新生仔ラット角層細胞膜由来のPauly反応陽性タンパク質

抄録

1．新生仔ラット表皮中に存在するhistidine-rich proteinを分離，精製するために，タンパクのhistidine，tyrosineおよびtryptophan残基と反応するPauly反応を電気泳動ゲルに応用し，その染色バンドをマーカーとして，精製を進めた．2．Tris-HCl，4M urea，8M アルカリ性urea抽出液を等電点電気泳動後，Pauly反応でゲルを染色したところ，Tris-HCl抽出上清の酸性領域に陽性バンドがみられた．3．それら陽性バンドのうち，タンパク当り最もPauly反応染色性の強かった等電点5.1のタンパクを抽出し，SDS-PAGEを行い分子量を測定した．4．SDS-PAGEの結果，主として4本のタンパクバンドがみられ，それぞれをアミノ酸分析したところ，分子量56，000のものがhistidine含量3.6％ともっとも高かったので，このものについて家兎にpolyclonal抗体を作成し，抗原に対する抗体の存在していることをimmunoblotting法により確認した．5．In vivoでの局在を検討するために，作成した抗血清を用いて蛍光抗体間接法を行った．その結果，特異蛍光は角層細胞膜にみとめられた．したがってこのPauly反応陽性タンパク質は角層細胞膜に局在することが判明した．