弘前医学
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弘前医学会抄録
〈一般演題抄録〉マウス脂肪組織由来 Muse細胞の樹立 -脊髄損傷に対する Muse細胞移植の確立に向けて-
新戸部 陽士郎熊谷 玄太郎佐々木 綾子和田 簡一郎田中 利弘工藤 整古川 賢一石橋 恭之
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2017 年 68 巻 1 号 p. 88-

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抄録

【目的】 Multilinage differentiating Stress Enduring (Muse) 細胞はMesenchymal Stem cells (MSCs) 中の多分化能が高い細胞として報告されているが、マウスから採取できるかは明らかではない。脂肪組織には白色脂肪組織 (WAT: White Adipose Tissue) と褐色脂肪組織 (BAT: Brown Adipose Tissue) がある。本研究の目的はマウス WAT および BAT から Muse細胞を分離できるか検討する事、マウス脂肪組織由来 Muse細胞の神経分化能を評価することである。
【方法】 6週齢雌 C57BL/6J マウスの鼠径部から採取した脂肪組織 (WAT群)、肩甲骨間から採取した脂肪組織 (BAT 群) それぞれにコラゲナーゼ処理を行い、MSC を単離、培養した。2回継代後に FACS を用いて CD90陽性、Sca1陽性、CD34陰性、CD45陰性をMSCs マーカーとして、SSEA3陽性 CD34陰性を Muse細胞マーカーとして解析した。Muse細胞は FACS、MACS を用いて分離し、SSEA3陽性細胞を比較した。細胞ダメージの少ない MACSで分離された細胞を神経誘導培地にて分化誘導し、成熟神経細胞マーカーである NeuN について組織学的評価を行った。NeuN陽性細胞数をカウントし全細胞数に占める割合を解析した。
【結果】 FACS による MSCsマーカーについては WAT群と BAT群で有意差は認めなかった。Muse細胞マーカーについては WAT群が2.4%、肩甲骨間群が2.2%だった。FACS と MACS で分離された SSEA3陽性細胞数に有意差は認めなかった。WAT-Muse、BAT-Muse、WAT-MSCs、BAT-MSCs 全群で NeuN陽性細胞に分化した。NeuN陽性細胞の割合は WAT群と BAT群で有意差は認めなかったが、Muse細胞で約28%、MSCs で約15%と Muse細胞は MSCsよりも NeuN陽性細胞に多く分化していた。
【考察】 ヒト脂肪組織由来 Muse細胞は3.0〜7.9%と報告されている。本研究ではマウス脂肪組織由来 Muse細胞はヒト由来よりも割合が低かったが、その理由の一つとして種の違いが考えられる。WAT-MSC が成熟神経細胞へ分化することは報告されている。本研究から BAT-MSC も成熟神経細胞へ分化することを明らかにした。脂肪組織由来 Muse細胞がTuj-1 陽性細胞 (未成熟神経細胞) へ分化することは報告されている。本研究ではさらに成熟神経細胞へと分化することを明らかとした。
【結語】 マウス白色・褐色脂肪組織から Muse細胞が分離された。脂肪組織由来 Muse細胞は成熟神経細胞へ分化した。

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