国内の6種オルソトスポウイルスを検出するマルチプレックスRT-PCR法の開発

抄録

本研究では，既報のオルソトスポウイルスを識別するマルチプレックスRT-PCR法（Uga and Tsuda, 2005; Kuwabara et al., 2010）を改良し，近年国内で新たに発生したウイルスを含め，現在国内のナス科作物で確認されている全6種［トマト黄化えそウイルス（TSWV），tomato zonate spot virus（TZSV），インパチエンスえそ斑点ウイルス（INSV），キク茎えそウイルス（CSNV），スイカ灰白色斑紋ウイルス（WSMoV）およびトウガラシ退緑ウイルス（CaCV）］を検出するためのマルチプレックスRT-PCR法を開発した．プライマーの設計，RT-PCRの条件検討の結果，最適化した条件で，これらのウイルスが感染したナス科植物からTSWV（831 bp），TZSV（734 bp），INSV（592 bp），CSNV（502 bp），WSMoV（395 bp），およびCaCV（324 bp）由来の種特異的増幅産物が確認された．さらに，本法を用いることで，供試したオルソトスポウイルスのいずれの組合せでも，ウイルスを同時に検出することができた．したがって，本手法は，ナス科作物に感染する6種オルソトスポウイルスの同時検出に有効であると考えられた．