Mycobacterium fortuitumを対象としたZiehl-Neelsen染色法と蛍光染色法における抗酸性の比較検討

抄録

〔目的〕Mycobacterium fortuitumを被験対象とした場合のZiehl-Neelsen染色法（ZN法）と蛍光染色法（蛍光法）の染色性の比較検討。〔方法〕2007年1月～2012年3月の期間中，NHO近畿中央胸部疾患センターにてMGIT培養で陽性となり，DDHにてM.fortuitumと同定された菌液42株と標準菌株を対象に，蛍光法であるauramine-rhodamine染色法（AR法）並びにacridine-orange染色法（AO法）とZN法の染色所見を比較した。さらに各菌株に対し16S-23S rDNA internal transcribed spacer（ITS）領域における遺伝子と16S rRNA遺伝子の部分配列シークエンスを実施し，相同性検索を行った。〔結果〕ZN法にてすべての株は良好な染色性を確認できた。AR法は16株（38.1%）に良好な染色性を認めていたのに対し，残り26株（61.9%）と標準菌株では蛍光法でほとんど染まっていないか，まだら模様の染色像であり，AO法もやや劣るがAR法と同程度の結果であった。ITSシークエンス解析では35株（83.3%）がM.fortuitum subsp. acetamidolyticumの遺伝子と100%一致したが，7株は同定不能であった。しかし16S rRNA遺伝子シークエンスにてM.fortuitum近縁の迅速発育菌と同定できた。遺伝子型と蛍光法の染色性との間における相関性は乏しかった。〔考察〕DDHでM.fortuitumと同定された菌体に対して蛍光法を用いた場合，検出が困難となるケースが半数以上存在する結果となり，同菌の分離頻度が過小評価される可能性が考えられた。特に，培養菌液からの菌体確認には蛍光法よりもZN法を用いることと，培養性状による同定（発育速度，温度，コロニー形状）の徹底を提唱したい。