Cryptococcus neoformans is an opportunistic human pathogen, which infects the central nervous system causing the fatal disease, meningitis. In order to understand the genetic background of this human pathogen, the basic molecular manipulation techniques of deletion, overexpression, and so on have been developed. URA5, a gene encoding orotate phosphoribosyltransferase, has frequently been used to introduce foreign gene fragments by complementing ura5 mutant strains, which are not, however, stable; reversion to uracil prototroph is thus frequently observed on selective condition. The high possibility of reversion makes it inconvenient to use this mutation to identify appropriate transformants and thus, manipulation in molecular genetics. We report here the isolation of a stable ura5 mutant of C. neoformans, designated as TAD1, by eliminating the URA5 gene by homologous recombination using the biolistic DNA delivery system. The availability of the stable ura5 mutant offers the advantage that no spontaneous reversion occurs so that a satisfactory rate of homologous recombination can be achieved. The strain will allow efficient genomic analysis in C. neoformans.

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某大学柔道部員31名,18～23歳について,Trichophyton tonsurans感染症の集団検診を行った.調査項目は,年齢,性別,身長,体重,居住様式,同居者数,運動時間,対戦者数,外国人対戦者の有無,患者から聴取した過去と現在における発疹の有無と時期,診察,真菌検査(KOH法,両面テープ法,真菌培養,hairbrush法)である.その結果,問診で過去に体に皮疹ありと答えた者は24名(77%),過去に頭に皮疹ありと回答したものは8名(26%)であった.診察時に,疑わしい皮疹があったのは11名(35%),うち検鏡・培養陽性3名であった.また,hairbrush法陽性であったのは11名(35%)で,頭に皮疹の有ったものは2名のみで残り9名は皮疹は見られず無症候性キャリアであった.対策として掃除,ミコナゾールシャンプーの使用,疑わしい皮疹には抗真菌剤外用,hairbrush法陽性者には,イトラコナゾール400mg/日の1週間パルス投与を行った.経時的な検診とhairbrush法の経過より,パルス療法を受けた7例中,指示通りに内服した3症例では1回のパルス投与で菌が陰性化することが判明した.

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症例1は3歳の頭部白癬,症例2は5歳のケルスス禿瘡で,いずれもカナダに在住していた1997年12月から1998年1月に発症.症例3は7歳のケルスス禿瘡で,日本在住の1998年3月に発症.症例1は当科受診の3週間前,症例2は1週間前よりグリセオフルビンの内服治療がおこなわれていた.症例1,2共,当科の初診日は1998年5月7日で,当科を紹介された医師により,当科初診の2～3週間前にそれぞれの病変より分離培養された菌を持参し来院した.菌はいずれもT.violaceumと同定された.当科で施行したKOH直接検鏡および培養は,症例1は,いずれも菌陽性であったが,症例2は,いずれも菌陰性であった.症例3の当科初診日は5月21日で,やはり病変よりT.violaceumが分離された.
分離培養後5ヵ月間保存された赤紫色分離菌株を,チアミン添加サブロー培地に継代培養したところ,2ヵ月後に赤紫色のコロニーと共に色素産性のみられない淡褐色のコロニーが発育している像がみられた.両者のコロニーについて,それぞれスライドカルチャーをおこなった所,共に介在性,末端性の厚膜胞子が観察され,さらに,random amplication of polymorphic DNA法の結果も両者間に差が認められないことより,両者は同一菌であろうと思われた.

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Nocardia abscessus, a recently established species, was isolated from patients during 2000. In the course of our taxonomic studies on 121 clinical Nocardia isolates in Japan 5 strains isolated from patients plus one strain isolated from soil in Japan, were found to have similar physiological characteristics to those of N. abscessus. Phylogenetic studies using 16S rRNA gene sequence analysis confirmed that these strains belong to N. abscessus. This is the first isolation report of N. abscessus from soil as well as from clinical samples in Japan.

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Sporothrix schenckii isolates from China, Korea and Spain were investigated for mtDNA types based on restriction fragment length polymorphism patterns with HaeIII. Sixty-one isolates from China, 8 from Korea and 11 from Spain were comprised of 7, 2 and 2 mtDNA types, respectively. All the isolates belonged to Group B.

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