ミルクサイエンス

粉ミルク中の総 L-カルニチンを定量するためには，短鎖結合型 L-カルニチンをアルカリ加水分解する必要があり，その条件としては短鎖結合型 L-カルニチンが加水分解され，且つ遊離 L-カルニチンに影響を及ぼさないことが求められる。そこで我々は，粉ミルクを対象に最適な前処理条件の検討を行った。その結果，最適なアルカリ加水分解条件として，0.2 N 水酸化カリウム溶液（反応溶液 pH 13），反応温度40℃，反応時間15分を選抜した。本測定条件による SRM1849a の総 L-カルニチン定量値は 13.4±0.04 mg/100 g（n＝3）であり，認証値（13.6±1.4 mg/100 g）と同等の値を示した。また，粉ミルク製品および原料を対象に妥当性評価を実施した結果，相対標準偏差，添加回収率，直線性ともに良好であった。以上の結果から，粉ミルクを対象にした総 L-カルニチンの定量において，本アルカリ加水分解条件は適当であることが示唆された。

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ラクトフェリン（LF）は，乳などの外分泌液に含まれる鉄結合性タンパク質であるが，単一物質としてはその多機能性が極めて高いことが知られている。そこで我々は，この多機能性が LF 自体に由来すること以外に，その他の生理活性成分と LF が挙動を共にすることで発現されている可能性について検討した。試薬や食品原料として使用される LF に夾雑する成分を，抗 LF モノクローナル抗体によるアフィニティークロマトグラフィー，イオン交換クロマトグラフィー，および逆相クロマトグラフィーなどによる多段階の方法で分画した。さらに，レーザーイオン化飛行時間型質量分析計による MALDI-TOF-MS プロテオーム解析で，含有されるタンパク質およびペプチドを調べた。その結果，塩基性の等電点をもつタンパク質やペプチドが51種類，酸性の等電点をもつタンパク質が22種類，および低分子のカゼイン分解ペプチド21種類が検出された。これらの中には，酵素活性，免疫調節作用，細胞増殖作用，細胞分化促進作用，抗菌作用，酵素阻害作用など，様々な生理活性を示す成分が含まれる。したがって，in vitro における培養細胞実験や，in vivo で非経口的に投与する動物実験での機能評価においては，LF の生理作用の解析に細心の注意を払う必要があると考えられた。

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