近年，南西諸島における系統地理学的研究は様々な生物種で盛んに行われており，種分化プロセスと地史的イベントとの関連性について興味深い知見が多く得られている．菌類に関しては研究例が殆どないのが現状であったため，演者らは手始めとして，オヒルギ (Bruguiera gymnorhiza) の腐朽木に定着するツブキクラゲ (Tremellochaete japonica) を材料に遺伝的変異とその地理的分布パターンに関する研究を行うことにした． 2010年11月に，奄美大島 (住用)，沖縄島 (慶佐次)，宮古島，石垣島 (宮良川, 吹通川)，西表島 (仲間川, 浦内川, 大見謝, 古見, 船浦) の計10地域のオヒルギ自生地において本種と思われる子実体を採取した．実験室に持ち帰り，形態観察による種同定を行った後，分離培養した．得られた培養菌株からDNA抽出後，rDNAのITS領域の塩基配列を決定することにより遺伝的変異を評価した． 合計113子実体試料を採取することができ，そのうち104試料の分離菌株を得ることができた．これらの菌株の塩基配列には，22サイトで多型がみられ，塩基配列の違いに基づく19のタイプが確認された．沖縄島以南の島では，島間で共通するタイプがみられた一方，宮古島，石垣島及び西表島と奄美大島との間では共通するタイプは一つもみられなかった．塩基配列の違いに基づくタイプにみられたこの様なパターンは，南西諸島に定着している本種の分布形成プロセスに，胞子による長距離分散以外に地史的な要因も関与している可能性を示唆している．

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スピッツベルゲン島で分離された低温菌〈I〉Trichoderma polysporum〈/I〉の成分研究 ○加茂美唯¹⁾・板橋武史¹⁾・河合賢一¹⁾・東條元昭²⁾・星野保^3,4)・細江智夫¹⁾（^1）星薬大；²⁾ 大阪府大生環；³⁾ 産総研；⁴⁾ 北大生命） Chemical screening of psychrotrophic fungi Trichoderma polysporum from Spitsbergen islands in Norway by M.Kamo1), T. Itabashi¹⁾, K. Kawai¹⁾, M. Tojo²⁾, T. Hoshino^3,4), T. Hosoe¹⁾ ( ¹⁾Hoshi Univ.; ²⁾Osaka Pref. Univ.; ³⁾AIST; ⁴⁾Hokkaido Univ.) 極限環境下に生息する微生物の中には環境適応戦略として，特殊な酵素や代謝系を獲得していることが知られている．低温菌もその１つで，低温活性酵素や低温条件下での特有な性質を保持していると考えられている．極寒冷地ノルウェー国スピッツベルゲン島（北緯71-81º，東経10-35º)で分離された真菌〈I〉Trichoderma polysporum 〈/I〉は温帯産同種株と類似した性質を保持する一方で，低温下での病原菌に対する拮抗性とポリガラクツロナーゼの生産性が高いことが報告されている．本研究では，スピッツベルゲン島の2 地点 (Barentsburg，Longyearbyen）に存在するカギハイゴケ群落から分離された〈I〉T. polysporum 〈/I〉6 菌株（Barentsburg からOPU1567, OPU1568, OPU1569 ，Longyearbyen からOPU1570, OPU1571, OPU1572)の第二次代謝産物について検討した．各菌株を2つの培養条件（米培地，4ºC, 約12ヵ月および20 ℃，約2ヶ月間）で培養した後，メタノール抽出した．メタノール抽出物は水/酢酸エチルで液液分配した後, 酢酸エチル抽出物としてHPLC/PDA 分析に供した．その結果，Barentsburg 採取菌株には認められないLongyearbyen採取菌株のみが産生する化合物 (分子式C₁₂H₁₅NO₂) の存在を明らかにし，その化学構造を決定した．

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浴室では，Exophiala, Scolecobasidium, Phoma, Cladophialophora, Phialophoraなどの，室内塵や壁面，結露した窓ガラス，さらには野外の浮遊菌などと異なったユニークなカビが多く見られる．これらのカビは，石鹸成分のみならず，合成洗剤の主成分のひとつである非イオン界面活性を栄養にすることができる特徴がある．とりわけScolecobasidiumなどいくつかのカビは，0.25%の濃度の非イオン界面活性剤のみを添加した寒天培地で生育することができる．前回は，野外の株の中に浴室で生育するカビと栄養特異性が類似したものはあるが，遺伝的に異なっていることを報告した．今回は，日本以外にも，ヨーロッパ，アメリカなどの浴室から採集されたScolecobasidiumなどを材料として，界面活性剤を栄養とするか否かなどの生理的特徴や，世界各地産の同じ属のカビの遺伝的関係を調べた．その結果，日本とヨーロッパの浴室のカビは遺伝子的に近いものが見つかったが，アメリカ産はそれらとはいずれの種とも異なっていた．一方，浴室のカビのルーツを探るため，浴室から採取された種と類似のカビの菌相を求めて，様々な野外の環境について調査を行っている．例えば，文献から分離報告のあった植物や，サポニンなどの界面活性剤を多く含むマメ科植物，さらには，灰分を多く含む葦焼きなどを例年行っている河原の土壌などについて，調査を行っている．いくつかの浴室特有のカビと共通のカビも認められたが、そのルーツを解明するには至っていない。

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コンクリートは，材質が無機質であり，アルカリ性であることから，コンクリートそのものに対してカビ（真菌）が生えることはないとされてきた．屋外では，ほこりの付着，降雨による汚れの付着，藻類や細菌の繁殖によって，カビの栄養分が供給されたことで，その後，カビが生えると報告されている．しかし，地下駐車場のように屋内と屋外の中間的な環境や，結露が生じた室内空間のコンクリート表面で，カビの発生についての報告はほとんどない．そこで，屋内で比較的湿った環境のコンクリート表面のカビの調査を行った．その結果，光学顕微鏡での観察では，多少日光が差し込み，表面が緑の斑点で汚れている所では緑藻類と思われる細胞が観察されたが，日光がほとんど差し込まない地下駐車場の柱では，緑藻類と思われる細胞は確認できなかった．培養による調査では，地下駐車場のコンクリート壁面からはクロカビ（Cladosporium）が優占種として検出され，そのほか，アオカビ（Penicillium）やコウジカビ（Aspergillus），ニグロスポラ（Nigrospora）,アルスリニウム（Arthrinium）が検出された．地下1階階段下の夏期には結露が発生しやすいコンクリート表面からは，優占種としてコウジカビが検出され，そのほかエンギオドンチウム属（Engyodontium album）と同定された白いカビが多く検出された．以上の結果から，比較的湿った環境の汚れの目立たないコンクリート表面でも，カビが繁殖していることが確認された．

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菌類の子実体には様々な毒素が含まれている．それらの毒素は菌食動物の食性幅や耐性の進化に影響を及ぼすことで，菌類と菌食動物の相互作用の形成に寄与していると考えられる．テングタケ（Amanita）属菌には子実体に毒素を含むものがあり，きのこ食性のハエにおいてはそれらの毒素に対する耐性が進化している．トビムシと菌類の共存の歴史は古く，デボン紀にまで遡ることができる．共進化の過程できのこ食性トビムシにはきのこ毒に対する耐性が進化していると期待される．しかしながら，きのこ食性トビムシのきのこ毒に対する耐性については研究がほとんど行われていない．そこで本研究ではきのこ毒に対するトビムシの耐性を明らかにすることを目的とした．テングタケ属菌の 2 種の毒素（イボテン酸とα-アマニチン）を段階的に異なる濃度で人工餌に添加してきのこ食性トビムシ（Ceratophysella denticulata）に与え，産卵数への影響を調べた．また，トビムシ種間の感受性を比較するために土壌性トビムシ（Folsomia candida）を用いて同様の実験を行った．その結果，天然にみられる濃度のα-アマニチンでは両種ともに産卵数の減少はみられなかった．一方，天然にみられる濃度のイボテン酸では土壌性トビムシの産卵数は著しく減少したものの，きのこ食性トビムシの産卵数に影響はみられなかった．これらの結果から，きのこ食性トビムシC. denticulataはきのこ毒であるイボテン酸に対し耐性を有していると考えられた．

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〔目的〕Byssochlamys属は単独子嚢胞子になりにくい特徴を有しているので，食品中では8個性子嚢胞子の状態で存在していると推測される．そこで，単独および8個性子嚢胞子の耐熱性を調べた．
〔方法〕1．単独および8個性子嚢胞子の耐熱性：供試菌株として飲料由来のByssochlamys fulva B0510株を用いた．PDA培地で30℃，30日間培養した子嚢胞子を，0.1Mリン酸緩衝液に懸濁させたものを8個性子嚢胞子懸濁液とし，これをガラスビーズ・超音波処理して単独子嚢胞子懸濁液を得た．耐熱性試験（D値，ｚ値）は，酒石酸・グルコース溶液を加熱媒体として用い，発芽率法で行った．加熱温度79～87℃，加熱時間2～130分と設定した．
2．単独子嚢胞子懸濁液の調製と耐熱性：1と同様に調製した8個性子嚢胞子懸濁液1mLを，超音波処理機（130W，周波数20kHz）を用いて，氷水中で冷却しながら60～240秒間超音波処理し，処理後，8個性子嚢胞子，単独子嚢胞子および破壊子嚢胞子数をそれぞれカウントした．この試験を3回反復し，単独子嚢胞子が得られる最適な処理時間を検討した．また，得られた単独子嚢胞子懸濁液を用いて，1と同様の方法で耐熱性試験を行った．
〔結果〕1．単独および8個性子嚢胞子のD値はそれぞれ，79℃:91.7分，121.8分，81℃:49.1分，68.5分，83℃:27.2分，29.6分，85℃:14.7分，20.0分，87℃:5.5分，12.4分となり，すべての加熱温度において8個性子嚢胞子が単独子嚢胞子よりも高かった．z値は，8個性子嚢胞子が7.9℃，単独子嚢胞子が6.7℃であり，D値と同様に8個性子嚢胞子が単独子嚢胞子よりも高かった．
2．最も多くの単独子嚢胞子を得ることができる処理時間は180秒であった．超音波処理単独法およびガラスビーズ・超音波処理法を用いて得られた単独子嚢胞子の耐熱性を比較したところ，差は認められなかった．

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Conidiobolus属菌は主に土壌，腐植などに生息する腐生菌であるが，一部の菌はヒト，動物に感染症を起こすことが知られ，特に熱帯圏では本菌による播種性感染症が報告されている．本属菌は接合菌類のトリモチカビ亜門，キクセラ亜門と系統関係にあることが示唆されており，接合菌類の系統進化を論じる上で鍵となる系統的位置にある菌群であると考えられている．本属菌の分類・同定は形態や生理学的性状に基づいた研究により現在32種以上知られているが，本属菌の系統分類は未だ確立されていない．我々は本邦産の本属菌の種相互の系統関係の解明を目的とし，土壌，腐植などから本属菌を分離し系統分類学的な研究を行っている．本属菌は15℃～35℃で生育する中温性菌が研究の対象となっており40℃以上で生育する菌に関する研究は殆どない．今回は高温条件下で発育する本属菌の分離法および系統的位置関係を検討した．
土壌，腐植など530サンプルを用いて40℃および25℃で5日間培養し，40℃のみで発育した菌株を分離した．参照株としてヒトから分離された高温性菌(IFM58391、IFM55973)を用いた．これらの菌株の18S rDNAの塩基配列を決定し系統解析を行った．高温性菌は4株(F325，F328，F329，F330)検出された．系統解析の結果，分離菌株4株およびIFM株は4つの系統群に大別された．今回分離した高温性菌およびIFM株は相互に類似した形態学的特徴を示すが，18S rDNAでは多様な系統関係にあり，形態，生理特性，遺伝子などの多相的な方面からの分類が必要であると思われた．

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ヘリコケファルム科は，5科からなるトリモチカビ目（トリモチカビ亜門）の一員で，付着器，吸器により線虫等の微小動物を捕食する培養困難な動物絶対寄生菌で，接合菌類の中でも特に解明が遅れており，その全容を理解する上での盲点となっている．世界より3属12種が知られ，日本からはRhopalomyces strangulatus（トムライカビ）(Sagara 1973; Tubaki 1973他)，Helicocephalum oligosporum （Watanabe & Koizumi 1976）の2属2種のみが知られてきたが，現在までにR. elegans（本州，南西諸島，土壌・動物糞上に普通）， H. diplosporum（本州，腐朽木上）の 2既知種が新たに確認された．本科菌類の探索には，宿主動物との関わりを絶たない状態で生息環境を観察する工夫が求められるが，こうした検討により多くの未記載分類群が検出され，本科は従来考えられている以上の多様性を有すものと推定される．ここでは未記載属と考えられる二種について報告する．
　1) Helicocephalidaceae gen. et sp. nov. 1. 鍾乳洞の蝙蝠糞（大分県）より直接平板法により検出．一次隔壁を欠如する菌糸が付着器を形成して線虫を捕捉し体内に吸器（同化菌糸）を生じ，胞子が強く暗色に着色する点でヘリコケファルム科の定義を満たす．しかし，一個の胞子が先尖型の胞子嚢柄上に側生する短枝（Rhopalomyces属のパピラに相同）の先端に形成され，疣状表面紋を有す点で既知属と区別される．Verrucocephalum latericorvinisporum nom. nud.として記載発表予定（投稿中）．
　2) Helicocephalidacae gen et sp. nov. 2. 節足動物死骸，土壌（神奈川県）より湿室法により検出．いずれも無性生殖構造と考えられる顕著な二型性を示す胞子嚢柄を形成する．一方は短い柄の先端に分節胞子嚢を形成，成熟に伴い中央の狭窄部で折れ曲がり，褐色で紡錘型の2胞子を生じる．他方は，長い胞子嚢柄先端に細くC字型に屈曲した分節胞子嚢を形成，成熟に伴い分断して無色で長円形の胞子を多数生じ液滴をなす．培地による培養には成功しておらず，生育基質は不明で動物の捕食も観察できていないが，無性生殖構造の形態的特徴は本科の定義を満たすものと判断される．

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2011年4月から5月にかけて筑波山中腹の３箇所の沢でフタバコカゲロウ(Baetiella japonica)を採集した．このカゲロウは大きめの石や岩盤の表面にしがみついており，左手で水をよけ，現れた幼虫を鋭利なピンセットでつまみとり氷冷して研究室に持ち帰った．採集された複数の個体において，肛門から伸び出た菌糸が観察された．5月23日に採集された個体では，21頭中4頭が肛門から菌糸を伸ばしていた．菌体の基部は半球形に寄主の後腸クチクラに食い込んでおり，周囲は褐色を呈していた．菌体は主軸があり，肛門から伸び出した後に隔壁部分から一箇所あたり2-3本に分枝し，これを繰り返した．菌糸先端付近は，6-14μm間隔で隔壁に区切られた胞子形成細胞を形成し，続いて斜めにトリコスポア（trichospore：離脱生の胞子嚢)を形成した．トリコスポアは細長い円筒形でカラーはなく，長さ50-62.4μm幅4.0-4.6μmであった．同様の菌体基部，分枝様式を持った菌体において，菌糸の先端部分が癒合し，中間に紡錘形の接合子の形成が認められた（高さ8.0-9.4μm幅38.0-42.0μm）．水生昆虫の肛門から菌体が伸び出すトリコミケテス類は，レゲリオミケス科(Legeriomycetaceae) のOrphella, Pteromaktron, Zygopolarisの3属である．Orphella属とは，トリコスポアの形態が異なり，Pteromaktronとは分枝のタイプが異なる．Zygoporarisとは，トリコスポア形成様式が似ているが，接合子の形態が異なる．従って，本属を新属と判断した．トリコミケテス類は観察に適した良い状態の標本を採集することが困難である場合が多いが，今回は，胞子形成が始まったばかりの菌体をスライドガラス上に１滴の沢の水とともに５℃で追培養を行い，トリコスポアの形成過程を約10日間連続観察できた．レゲリオミケス科のように分枝する菌体を持つトリコミケテス類は，分離培養までは達成できなくても，追培養による形態形成観察は有用な手段であると考えられた．

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ツボカビは，古くから湖沼など淡水域における植物プランクトンの個体群動態に大きな影響を及ぼす生物要因として注目され，近年では植物プランクトンとの相互関係（共進化）や食物網の中で果たす生態学的役割についても研究が進められている．しかし，海産植物プランクトンに寄生するツボカビに関する知見は極めて乏しいのが現状である．演者らは，麻痺性貝毒（PSP）の原因種である海産渦鞭毛藻Alexandrium tamarenseが生活史の一時期に形成するシスト（休眠細胞）から発芽した細胞に寄生するツボカビを発見したので，本講演ではその形態学的特徴と発達過程について報告する．
愛知県三河湾から採取した海底堆積物から泥懸濁液を調製し，シストの発芽に好適な条件（12.5℃，明暗周期12hL:12hD）下で培養した．培養開始後，遊走子と思われる粒子が付着した発芽細胞を分離・培養し，その形態と発達過程を光学および電子顕微鏡（SEM，TEM）を用いて観察した．
A. tamarense発芽細胞に付着した遊走子は数日のうちに成長し，内部に小型顆粒が多数認められるようになった．さらに成長が進むと，菌体内部に遊走子が充満し，遊走子嚢となった．遊走子嚢は径約20µmの球状で，蓋状の構造はみられなかった．その後，遊走子は遊走子嚢内で運動し始め，最終的には外部に放出された．遊走子は頭部が約2 µmの球形で，後端に長さ約16 µmのムチ型鞭毛1本を有した．TEM観察の結果，遊走子は脂質粒子を1個持ち，ミクロボディ-脂質小球粒複合体（MLC）と1個のミトコンドリアならびにリボソームが細胞中央にまとまって位置するが，核はそれとは一線を画するといった特徴を示した．これらの菌体および遊走子の形態学的特性から，本菌はツボカビ目（Chytridiales）の一種と考えられた．また，菌体の発達過程を経時的に調べた結果，本菌の生活環はほぼ2日間で完結することが明らかとなった．今後，海洋生態系における寄生性ツボカビの役割を解明するため，本菌の分類，生理・生態に関する研究をさらに進める必要があると思われる．

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The genus Phytopythium is a newly established genus consisting of water and soil inhabiting species (Abad et al (2010). Several species such as P. helicoides are water and soil borne plant pathogens causing root rot disease. The genus Phytopythium is characterized by high optimum and maximum growth temperature approx.30 C and 35-40 C respectively ( Kageyama 2010) and the formation of ovoid, proliferous sporangia and broadly attached antheridia. The isolate GUCC 7020 isolated from water in Iriomote Island in Japan grew at 15-35 C. The optimum temperature was 30 C with a radial growth of 43 mm 24 h-1. The isolates is morphologically characterized by globose sporangia with papilla and no papilla, internally and internally nested proliferating sporangia, terminal and intercalary chlamydospore, compound sympodia, and plerotic or nearly plerotic oospore. On the other hand, the isolate FP1 from a dumped-off seedling of buckwheat in Akita prefecture grew at 10-40 C. The optimum temperature was 30 C with a radial growth of 39 mm 24 h-1. The isolate was morphologically characterized by globose sporangia with apical papilla, internally and internally nested proliferating sporangia, coiling antheridial stalk, wavy, sessile and cleavate shape antheridia. These morphological features were similar to the Phytophthora fagopyri isolate, CBS 293.35 (Pythium helicoides by Plaats- Niterlink, 1982). Phylogenetic analyses of the r-DNA ITS region, LSU gene , coxI and coxII gene revealed that the two isolates were distinct species. The isolate GUCC 7020 was closely related to P. oedochilum and P. mercuriale, whereas the isolate FP1 was identical to CBS 292.35 and closely related to P. chamaehyphon and P. helicoides. By integrating morphological and molecular characterizations the isolate GUCC 7020 will be a new species, and the isolate FP1 will be a redefined species from the genus Phytophthora to the genus Phytopythium.

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土壌及び水媒伝染性植物病原菌Pythium irregulareは，種内で分子系統的に4つのグループ（I～IV）に分かれると報告されていた（Matsumoto et al. 2000）．最近，この4つのグループのうちグループIIは，形態的及び分子系統的に差があるとしてP. cryptoirregulareという新種とされた（Garzón et al. 2007）．しかし，この差は大きくないため同定を行う際に混乱が生じている．そこで，本研究では特に植物病原菌として重要なグループIとIIについて地理的由来・宿主の異なる菌株を用い，形態・分子系統・病原性の点から分類を再検討した．形態を比較したところ，2つのグループの間で有意な差があるとされていた造卵器及び卵胞子の直径，Ooplast Indexで2グループを区別できなかった．また，rDNA-ITS領域，LSU D1/D2領域，COXI遺伝子，COXII遺伝子，β-tubulin遺伝子を用いて分子系統解析を行ったところ，ITS領域の塩基配列には菌株内多型があるものもあり，これまでのITS領域の系統解析についての報告とは異なり，グループIとIIは単系統とならなかった．また，ITS領域以外の領域においても明確に2系統に分けることはできなかった．11のプライマーを用いたRAPD-PCR分析においても，いずれのプライマーにおいても2つのグループを明確に区別することはできなかった．病原性の比較では，菌株間差はあったがグループ間に差はみられなかった．これらのことからP. irregulareとP. cryptoirregulareの間に差はなく，1種に戻すべきと考えられた．

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近年，白さび病菌目（Albuginales）では分子系統解析が盛んに行われ，その結果と形態や宿主との関係から，タデ科，ヒユ科およびスベリヒユ科寄生種をWilsoniana属，キク科寄生種をPustula属としたり（Thines and Spring, 2005），韓国産ナズナ寄生種（Albugo koreana Y.J. Choi, Thines & H.D. Shin, 2007）やシロイヌナズナ寄生種の一系統（A. laibachii Thines & Y.J. Choi, 2009）を新種としてアブラナ科寄生種A. candida (Pers.) Rousselから分割するなどの分類学的再編が行われてきた．一方，サツマイモ属（Ipomoea）寄生種ではアサガオ類に寄生する2種の宿主特異性が報告されたが（Sato et al., 2009），詳細な分子系統解析は行われておらず，分子系統と寄生性の関係は明らかにされていない．そこで，国内で採集したIpomoea属植物上の生菌および海外の乾燥標本を用いて，rDNA ITS領域の塩基配列に基づき分子系統解析を行った．得られた系統樹では，形態に基づきA. ipomoeae-panduratae (Schwein.) Swingle，A. ipomoeae-hardwickii SawadaおよびA. ipomoeae-aquaticae Sawadaと同定された標本は，他の白さび病菌とは異なるclusterに所属し，各種は単独のcladeを形成した．また，前2種の標本は宿主ごとにsub-cladeにまとまり，ITS領域による分子系統はほぼ寄生性を反映することが明らかとなった．すなわち，A. ipomoeae-pandurataeに属するf. sp. lacunosae（マメアサガオ寄生系統）とf. sp. trilobae（ホシアサガオ寄生系統）および，A. ipomoeae-hardwickiiに属するf. sp. hederaceae（アメリカアサガオ寄生系統）とf. sp. nile（栽培アサガオ寄生系統）の各分化型間には，わずかであるがITS領域の塩基配列に差異が認められた．ただし，国内未確認のサツマイモ寄生種A. ipomoeae-pandurataeの標本は，サツマイモに寄生しないマメアサガオ寄生系統f. sp. lacunosaeと塩基配列が一致，あるいは高い類似性を示し，同領域が寄生性の差異を反映しない結果となった．今後，国内未確認のグンバイヒルガオ寄生種A. ipomoeae-pes-caprae Cif.も加えIpomoea属寄生種全体の系統関係を明らかにしたい．

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Trichoderma属は，一般に土壌や腐朽した木材に腐生的に生息していると考えられている．しかし近年，植物の内生菌として，未記載のTrichodermaが分離されたという報告が複数あり，これまで調査されてこなかった基質に新種のTrichodermaが多く存在する可能性が示唆された。そこで植生の違いから日本にも多くのTrichoderma未記載種が存在するであろうことが予想された．このような背景に基づき日本において土壌以外の基質をターゲットとしたTrichodermaの探索を行った． 沖縄本島，石垣島，西表島，熊本，岩手などの，主としてきのこ栽培農家を訪ね，Trichoderma様の菌叢の認められる原木，菌床，栽培きのこ子実体などを採集し，希釈平板または湿室法を用いた直接分離により糸状菌を分離した．今回の分離株および過去に栽培農家で出現したTrichoderma関連株，合計42株について形態観察，分子系統解析を行い，一部CBS，KCTCから分譲を受けた標準株とも比較を行った．その結果，7種の既知種，6種の未記載種と思われる種，4種の日本新産種と思われる種を確認した．

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多彩色の漆喰壁画で知られるキトラ古墳・高松塚古墳（奈良県明日香村，7c末～8c初頭築造）において，2004年から石室内外に発生する菌類相の調査が定期的に行われてきた．その調査の過程において，石材や漆喰片などの基質から堅固な針状体の菌類が検出，17株分離された．これらは単生で赤褐色の分生子柄の先端に多量のフィアロ型分生子を粘塊中に形成する点で特徴付けられ，形態的特徴からKendrickiella phycomycesと同定した．そこで，分離株と（異名）Phialocephala phycomycesとして同定・保存されているMUCL 4271・38565の2株と比較検討した結果，両者の培養性状および形態的特徴はほぼ一致しているものの，18S，28SおよびITS領域の塩基配列において数～十数塩基の差異が認められた．また，各遺伝子の分子系統解析の結果，これら分離株とMUCL 2株はChaetomella，Pilidium両属とクラスターを形成し，他菌群とは離れた系統を示した．従来，K. phycomycesはEurotialesに帰属するとされていたが，今回の解析結果において，Eurotialesとは明らかに異なる分子系統学的位置を示した．漆喰の主成分である炭酸カルシウムを含むGYC寒天平板培地で培養した結果，顕著な茶褐色の可溶性色素の産生，炭酸カルシウムの溶解能および再結晶化が認められた．この現象は古墳の石材や目地漆喰，また漆喰壁画の劣化に影響を及ぼしていたと考えられる．

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ブルーチーズは, 代表的なカビ付け成熟型チーズのひとつで, その生産にはPenicillium roquefortiが用いられている．生産過程でのこの菌の添加は, 特有の臭いとテクスチャーを生むことになる． ブルーチーズとして有名なのは, ロックフォールト（フランス）, フルム・ダンベール（フランス）, ゴルゴンゾーラ（イタリア）, スティルトン（イギリス）などで, 今日では, これらの他にもデンマーク, ドイツ, スイスなどのヨーロッパ諸国において, また, 日本においてもP. roquefortiを用いたカビ付け成熟型チーズが生産されている． これら多様な原産地と製法の相違は, いくつかの遺伝的に変異したP. roquefortiがブルーチーズ生産に用いられていることを予想させる．本研究では, 市場で入手した34種のブルーチーズの各々からP. roqueforti を分離し, beta-tubulinのイントロンを含む部分塩基配列（447塩基対）を基にその遺伝的変異を近隣結合法により解析した． 分離された34株は, 2つのクレードに分割され, 一方のクレードは, 4種のロックフォールから分離された4株を含29株から成り, もう一方のクレードはフルム・ダンベールから分離された1株を含む5株から成っていた．ロックフォールとフルム・ダンベールの2つは, 最も古くから生産されているブルーチーズで, その歴史はローマ時代にまで遡るといわれている．これら古くから生産されている２つのチーズの生産で異なる系統の菌株が使用されていることは興味深い．ただし, これら2つの系統間で異なる塩基配列数は2塩基のみで, 近縁のP. roquefortiがブルーチーズの生産に用いられているものと考えられる．ブルーチーズの風味やテクスチャーの相違は使用する原乳や共存する微生物の相違によってもたらされると思われる．

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新規生物活性物質の探索源として亜熱帯地域および海洋島由来の糸状菌に着目し，これまで， Trichoderma polysporum FKI-4452，Mortierella alpina FKI-4905 等から新規化合物を報告してきた．特に海洋島は現在に至るまで一度も陸と繋がった事がない大洋上の島であり，そこに生息する生物は大陸と隔離されたまま独自の進化を遂げてきているため，固有の生物相がみられる．このことから糸状菌においても固有種や未記載種を発見出来る確率が高いと考えられる．これまで，日本本土を含め，海洋島である東京都伊豆諸島の八丈島，青ヶ島および小笠原諸島の父島土壌を中心に糸状菌の分離を行ってきた．これらの島々から分離された糸状菌を属レベルで分離頻度を調査したところ，日本本土と比べVerticillium 属の分離数が非常に多い傾向にあった． 近年，GamsらによりVerticillium sect. Prostrata は５つの属へ再分類が行われた．当研究室の分離株を光学顕微鏡による形態観察およびITS領域の塩基配列に基づいて同定を試みた結果，18株をSimplicillium 属と同定した．18株の内，１株をS. obclavatum と同定し，残り17株は既知種とは分生子の形態が異なっていた．未記載種の可能性が高いと考えられる17株の内、２株（Simplicillium sp. FKI-4981 およびFKI-5985）から新規化合物を発見した．現在，その他の株の培養液についても各種評価系でアッセイを行っており，新規生物活性物質が発見される事を期待している．

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Dinemasporium属は単子葉植物を中心とした様々な枯死植物上に生じる分生子果不完全菌類であり，剛毛を有する子実体と，無色・単細胞で両端に1本の付属糸を持つ分生子によって特徴づけられる．本属に類似した属としてDiarimella属とStauronema属が知られているが，Diarimella属では分生子両端に複数本の付属糸を持つこと，またStauronema属では分生子両端に加え側面にも付属糸を持つことにより別属とされている．子実体や分生子の形態的類似性からすると，これら3属は近縁であることが推測される．しかしテレオモルフ情報がほとんど無いことや，分子系統解析が行われていないことから，3属の分類学的位置は不明であった．また分生子の付属糸形態（付属糸の本数と着生部位）のみを重視した上記3属の分類が妥当なものであるか否かについては，これまでに検討されてこなかった．本研究ではこれら3属の27菌株を用いてリボソームDNAの28S, ITS領域に基づいた分子系統解析を行った．その結果，上記3属はフンタマカビ綱，Chaetosphaeria目，Chaetosphaeria科内で単系統群として強く支持されるクレードを形成することが明らかとなった．しかし，各属の単系統性は否定され，Dinemasporium属は6系統群，Diarimella属は3系統群，Stauronema属は2系統群からなることも判明した．以上の結果は分生子の付属糸形態の微小な差異に基づいて分類されてきた従来の属概念が誤りであり，これらの菌群は単一属として統合されるべきであるか，あるいは反対にこれらの菌群はさらに細かい分類基準により多数の属へと細分化されるべきであることを示唆する．この問題を明らかにするためには，解析に用いる本菌群の種数をさらに増やし，他の遺伝子領域に基づいた分子系統解析も行うことで，本菌群の分類を再考する必要があると考えられる．

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Distocercospora属はPons & Suttonにより1988年に設立された糸状不完全菌で，これまでに3種が知られている．これらの内，2種はヤマノイモ属植物上から見いだされ，残りの1種はLivistona属植物より見いだされたD. livistonaeである．また，その形態的特徴からCercospora様菌類とされているものの完全世代はMycosphaerella属であろうとされているが，完全世代が未だ見いだされておらず，分子系統上の位置づけは不明であることから最近の分類上位置づけも不明確である．そこで，Distocercospora属の分類学上の位置づけを明らかにすることを目的に基準種であるヤマノイモ属植物上のD. pachydermaとビロウ属植物上より見いだされたD. livistonaeを材料とし，培地上での分生子の人工形成を試み，光学顕微鏡および走査型電子顕微鏡にて観察を行うとともに，複数の領域の塩基配列を基に分子系統解析を行った．結果，D. livistonaeは18S rDNA塩基配列はCapnodiales内の菌と相同性が高く，28S rDNA D1/D2領域はCapnodialesのMycosphaerella属内シンアナモルフとして独立したクレードを形成した．しかしながら，D. pachydermaは近縁なものの系統樹上やや離れた場所に位置し，さらに，D. livistonae のEF-1alpha領域の塩基配列ではBLASTサーチにて類似する配列を見いだすことが出来なかった．このことからDistocercospora属を分割する必要があることが示唆されるが，形態的特徴を初めとした他の諸形質を明瞭にする必要もあり，更なる研究が必要と判断した．また，アジアからアフリカにかけて広く分布するD. pachydemaに対し，D. livistonaeは，南西諸島・小笠原諸島で採集されたものだが，複数遺伝子領域の解析から台湾周辺が起源地と推定される宿主植物の海流分散の過程と密接な関係を示し，それぞれの島で宿主を獲得したのではなく宿主と共に分散したことを示唆した．

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ヒアロスキファ（ヒナノチャワンタケ）科は70属900種を超えるビョウタケ目最大の科である。演者らは、本科の系統分類に興味を持ち，日本産菌類相を明らかにすると同時に，その分子系統学的解析を行い，分類体系の再検討を行ってきた．本科は，大きく1）子実体形成菌糸層を持ち，無柄の子嚢盤を形成するArachnopeziza類，2）中型から大型で槍形の側糸か，顆粒を有する毛を持つLachnum類，3）小型で，さまざまな形態の毛をもつHyaloscypha類の3群から構成されるが，さらにこれらを細分化する意見もあるなど，科内分類群については見解の一致を見ていない．演者らは，2）について複数遺伝子を用いた系統解析を行ない，属レベルの分類を整理した．次に，残り二群について予備的検討を行い，いくつかの分子系統学的に強く支持される系統群を明らかにしてきた。本講演では，上記三群に加え，他のビョウタケ目菌類も含めて解析を行ない，本科の分類を考察した．上記1),3)群に属する22属26種を用い，ITS-5.8Sリボゾーム領域（ITS）, LSUのD1-D2領域（D1D2），polymerase II second largest subunit（RPB2）ミトコンドリアSSU（mtSSU）の4遺伝子を結合して最尤法（RAxML）で解析した．まず，2）は単系統であることが示され，これらをLachnaceaeとして独立させる見解（Raitviir 2000）を支持した．これに対し，1），3）の二群は複数のクレードに分解し，これらの菌群の分類は支持されなかった．本科の基準属であるHyaloscyphaは，よくまとまったクレードを形成したが，このほかに複数属からなる別なクレードが強く支持された．ヒアロスキファ科の属は毛の性状を主要形質としてまとめられているが，属のまとまりはおおむね支持される一方，類似した形態が収斂進化によって生じていることが明らかになった．

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ブラジル土壌から分離した Aspergillus fumisynnematus とアメリカのガン患者から分離された Aspergillus luntulus のタイプ株を MA, PDA 平板を用いて対峙培養をしたところ，接種約3ヶ月後に対峙面に白色の子のう果を形成し，子のう胞子も成熟した．子のう胞子の形態は既知のヘテロタリック Neosartorya の子のう胞子とは異なり新種である事を認めた．子のう胞子を 70℃，30 分の加熱処理をおこない発芽を確認し，両種は同一種であることが示唆された．形成されたテレオモルフは新種Neosartorya fumisynnemata とし，アナモルフは A. fumisynnematus で，A. luntulus はそのシノニムとした．A. fumisynnematus は分生子束を形成する事を特徴として創設された種であるが，今回対峙培養をおこなった株の集落は綿毛状で，分生子束は形成しなかった．しかし，子のう胞子から発芽し生育した集落はビロード状，綿毛状，縄状，分生子束状の多様性を示した．これらの菌の MAT 遺伝型はブラジル産の A. fumisynnematus が MAT-1-1，A. lentulus が MAT-1-2 を示した．子のう胞子から発芽形成された株は MAT1-1 と MAT1-2 が認められた．親株及び F-1 株についてβ-tubulin, calmodulin, actin 遺伝子を用いて系統関係を分析した結果，子のう胞子形成時に染色体の組換えが起こっている事が認められた．

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