生物物理化学
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35 巻, 2 号
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  • 1991 年 35 巻 2 号 p. 59-60
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
  • 1991 年 35 巻 2 号 p. 61-66
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
  • 1991 年 35 巻 2 号 p. 67-87
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
  • 1991 年 35 巻 2 号 p. 88-97
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
  • 吉田 治弘, 池本 卯典
    1991 年 35 巻 2 号 p. 99-105
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    ヒト精漿の個人識別に有用な標識を検索することを目的として, ミクロ2次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動法 (M2D-PAGE) および細管式等速電気泳動法(CITP) の有用性を検討した. M2D-PAGEにより精漿のAcp, Alb, Tf, γ-Smのスポットはその染色強度, 数などに個体差を見いだした. また, CITPのUV吸収のピーク面積の個体差にM2D-PAGEとの関連性を認めた. 2次元目を6~25%としてM2D-PAGEを銀染色した結果, 分子量5000付近の低分子領域に13個のスポットが検出された. そのうちの3個の低分子精漿蛋白質 (Lsp) に個体差が認められ, その変異は6種の表現型として観察された.
  • 松田 基夫, 松本 一政, 金内 長司, 政岡 俊夫, 赤堀 文昭, 山田 隆紹
    1991 年 35 巻 2 号 p. 107-112
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    In order to determine the suitable conditions for gaining distribution of DNA fragments useful for the chromosomal DNA analysis of the thermophilic Campylobacter, C. coli, C. jejuni and C. laridis, we were interested in the poor G+C content of the chromosomal DNAs and the intact DNAs embedded in agarose blocks were digested with 15 restriction enzymes which can recognize sequences containing only G and C nucleotides (NotI, SfiI, ApaI, BglI, SacII, SmaI and HpaII), sequences rich with G and C (BamHI, KpnI, PstI, SalI and XhoI) and some other sequences (DraI, EcoRI and HindIII) respectively. The resulted restriction fragments were fractionated by pulsed-field gel electrophoresis.
    When the chromosomal DNAs prepared from the 3 Campylobacter strains were digested with two restriction enzymes (NotI and SfiI) available with 8-base recognition, electrophoretic profiles of the digested chromosomal DNAs were shown to be very similar to those of each undigested chromosomal DNAs, respectively.
    The DNAs digested with EcoRI migrated at the same level as each undigested chromosomal DNAs by unknown reason(s).
    Twelve other restriction enzymes were able to cut the DNAs from the 3 Campylobacter strains with the exception that KpnI did not cut the DNA from the C. jejuni strain. Among the enzymes, ApaI, SalI and SmaI cut the DNAs from the 3 Campylobacter strains into a relatively limited number of restriction fragments in the range of approximately 50-1, 500kb in length.
    Thus, three restriction enzymes, ApaI, SalI and SmaI, were found to produce distributions of DNA fragments useful for chromosomal DNA analysis of the 3 Campylobacter strains by pulsed-field gel electrophoresis.
    Moreover, the genome size of the 3 bacterial strains were preliminarily estimated to be approximately 2, 000kb for C. coli JCM 2529T, 1, 900kb for C. jejuni JCM 2013 and 1, 700kb for C. laridis JCM 2530T in length, respectively.
  • 柏木 史郎, 中村 和行, 竹尾 和典, 伊藤 治英
    1991 年 35 巻 2 号 p. 113-120
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    血漿フィブロネクチン (FN) とゼラチンの結合様式を解析するために, ゼラチンを親和リガンドとしたFNの親和電気泳動法 (AEP) を行った. ウシ血漿由来精製FN, 健康成人血清および血漿を材料とし, 4%ポリアクリルアミドゲルを支持体としてAEPを行い, 両者の相互作用に対するpH, 尿素, 還元剤, 温度の影響を検討した. FNはニトロセルロース膜上に転写した後, 免疫染色により同定した. FNの相対易動度の変化をゼラチン濃度に対してプロットし竹尾の方法 (Electrophoresis, 5: 187, 1984) の方法により解離定数 (Kd) を算出した. 分離pH3.8で, 両者の親和性は分離pH9.5に比べ著しく低下した. 尿素により両者の親和性は低下し, ゲル中の尿素濃度が2M, 3M, 4Mでは, 37℃におけるKdがそれぞれ1.49×10-7M, 2.5×10-6M, 3.58×10-6Mであった. 2-メルカプトエタノール (2-ME) でFNを還元すると, 2-MEの濃度が100mMでは, 親和性の低下したFN単量体と思われるバンドが複数現われ500mMでは, 親和性の消失した単一のバンドとなった. 両者の親和性は低温で増大, 高温で減少し, 60℃では消失した. 15℃から50℃の間では, log Kdと絶対温度の逆数が負の直線関係を示した. これらの結果からFNとゼラチンの結合には, 疎水性相互作用よりも, 水素結合や van der Waals 力が重要な役割を果たしていることが結論された.
  • 山本 学
    1991 年 35 巻 2 号 p. 121-128
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    SDS-電気泳動と immuno-blot 法を用いて, I型およびII型コラーゲンの混在試料中のII型コラーゲンの定量法について検討した.
    蛋白染色法では, 多量のI型コラーゲンを含むII型コラーゲン混在試料を用いた場合, 全α1鎖の染色性が理論値よりも低下するという問題を有するものの, I型コラーゲンが0.24μg以下, II型コラーゲンが0.51μg以下においては10%以内の誤差で混在試料中のII型コラーゲンの定量が可能であった.
    一方, immuno-blot 法では, 1.5ngのII型コラーゲンを検出でき, II型コラーゲンのみ含む試料を用いた場合, 3ngから75ngの範囲内で高い定量性を示した. また, 240ngのI型コラーゲンを含む混在試料を用いた場合でも, 免疫染色時間を短縮することにより, 600ng以下のII型コラーゲンを特異的に定量できた.
  • 鉄取込みと Ferroxidase 活性について
    山口 稽子, 飯田 真一郎, 青木 保典, 片山 敬, 浅川 英男
    1991 年 35 巻 2 号 p. 129-133
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    本研究では3'-Me-DAB誘発肝癌フェリチン(RHpF)の鉄取込みと ferroxidase 活性を測定し, 正常肝組織フェリチン (RLF) および心フェリチン (RHF) のそれと比較した. RHpFの等電点電気泳動は酸性にシフトし, Hサブユニットの割合が上昇した. しかし, RHpFの鉄取込み速度と ferroxidase 活性はRLFに比べて低下した. 他方, H優位フェリチンのRHFは試験されたフェリチンの中で最も高い速度と活性を示した. これらの結果から, 肝癌フェリチンのHサブユニットの性状が正常フェリチンのそれと異なるのではないかと推論した.
  • 南 宏明, 箭原 修, 小野寺 壮吉
    1991 年 35 巻 2 号 p. 135-141
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    肥大心における構造タンパク質の量的変化は知られていない. わたしたちは二次元電気泳動とピリジン抽出法よりなる構造タンパク質の定量法を改良し, それらの変化を検討した.
    肥大心における構造タンパク質の量的変化を調べるため, 自然発症高血圧ラット, 腎動脈狭窄ラット, 大動脈狭窄ラットと3種の左室肥大モデルを用いた.
    高分子量のタンパク質の分析は一次元目の等電点電気泳動の中に入らないので困難であった. そのためわたしたちは一次元目のポリアクリルアミドのかわりに agarose を用い, タンパク質の分解なしに可溶化できる8M塩酸グアニジン溶液で心筋をホモジナイズした. またスラブゲルの大きなスポットと小さなスポットを一度に定量するため, 25%ピリジン溶液で染色されたスポットからの色素を抽出し分析した.
  • 宮地 真実, 桜井 花織, 戸塚 実, 市川 徹郎, 勝山 努, 金井 正光
    1991 年 35 巻 2 号 p. 143-149
    発行日: 1991/04/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    舌癌摘出手術直後, 男性患者の血清中LDH活性がLDH結合性免疫グロブリン (IgG (κ) type) により異常低活性値(43U/l)を示した. LDHアイソザイム分析では, LDH4付近に収束した3本の異常バンドのみが検出された. その後病態の改善とともに活性値が上昇し, アイソザイムパターン上にLDH1~5の位置に対応する5本のバンドと新たな異常バンドが観察された.
    LDHアイソザイムとLDH結合性免疫グロブリンとの再結合試験の結果より, これらの変化はLDHアイソザイムとIgGのモル比の違いによるものと思われた. また, このLDH結合性免疫グロブリンによる活性阻害率は0℃と室温で差はなく, しかも各温度における24時間保存後の活性阻害率の変化は認められなかった.
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