生物物理化学
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46 巻, 3 号
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  • 大井 絹枝, 中谷 中, 登 勉, 櫻井 裕子, 住田 安弘
    2002 年 46 巻 3 号 p. 129-134
    発行日: 2002/09/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    糖尿病においてコレステロール分画とトリグリセライド分画の同時解析法を用いて脂質分画の詳細と変性LDLを荷電変性度数 (CMF) として測定し, 変性LDL陰性例と陽性例にわけて比較した. 空腹時血糖・ヘモグロビンA1c値では差を認めなかったが, 高脂血症表現型, IDLの出現, 各項目の平均値, HDL分画・LDL分画の組成比に差を認めた. 高脂血症表現型では対照群・DM-CMF(-)・DM-CMF(+)の順にIIa型が減少し, IIb型・IV型が増加した. HDL分画・LDL分画では対照群・DM-CMF(-)・DM-CMF(+)の順に Chol の減少, TGの増加が認められた. 糖尿病性合併症の有無で比較すると, 腎症では病期の進行に伴って変性LDLの出現率が増加し, CMFも上昇した. 糖尿病患者において脂質分画と変性LDLを測定することは, 高脂血症・腎症のモニターとして臨床的に有用と考えられた.
  • 小山 岩雄, 小峰 伸一, 穂苅 茂, 松永 俊之, 小林 美奈子, 菰田 二一
    2002 年 46 巻 3 号 p. 135-141
    発行日: 2002/09/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    ラット肝臓に高活性でアミラーゼが存在することは知られているが, その役割についての報告はない. そこで今回, ラット肝臓ホモジネートより, イオン交換クロマトグラフィーおよびゲル濾過クロマトグラフィーにて蛋白染色で単一バンドにまで精製した. ラット肝臓は1日絶食させてから調製した. 絶食させないと肝臓アミラーゼはグリコーゲンと複合体を形成し, ゲル濾過クロマトグラフィーの担体に親和性がなくなり, 精製度が低下した. 絶食させることで, その担体に強い親和性を示し, 標準物質であるチトクロムcより遅延して溶出された. 絶食させることで, 肝臓アミラーゼ活性は有意に上昇したが, これは肝臓におけるグリコーゲン代謝にアミラーゼも関与することを示唆するものかもしれない. 対して, 自然発症糖尿病BBウィスター系ラットにおいてその肝臓アミラーゼ活性について検討したところ, 正常ラット肝臓より有意に低活性を示した. しかし, その糖尿病ラットの肝臓アミラーゼは酵素学的に正常のそれと変化なく, アミラーゼ分子の断片化による失活によるものと考えられた.
  • 長坂 祐二, 藤本 正憲, 中村 和行
    2002 年 46 巻 3 号 p. 143-146
    発行日: 2002/09/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    JURKAT細胞の増殖とMAPキナーゼ・ファミリーのリン酸化状態に対するケルセチンの影響を検討した. ケルセチンは, JURKAT細胞の増殖を抑制し, DNAの断片化を誘導した. ケルセチンは, ERKのリン酸化を24時間では促進し, その後 (48~96時間) 抑制する2相性の作用を示した. JNKのリン酸化は影響されなかった. ケルセチンは, p38 MAPKのリン酸化を48時間以降抑制した. ケルセチンの細胞増殖抑制作用には, ケルセチンによるMAPキナーゼ・ファミリーのリン酸化状態の修飾が関与している可能性が示唆された.
  • 杉本 佳代, 青木 絵美, 金澤 亜矢子, 平塚 信夫, 栗原 由利子, 青木 大一郎, 鈴木 仁, 芝 紀代子, 小林 静子, 小林 貞男
    2002 年 46 巻 3 号 p. 147-152
    発行日: 2002/09/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    Methods for separating proteins according to molecular weight are usually based on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). However, the toxicity of acrylamide and its handling during gel preparation constitute a significant problem. Therefore, we determined the molecular weights of proteins using agarose gel instead of polyacrylamide. We used the Mupid electrophoretic apparatus, because it is small, easy to use, and time-saving. We evaluated different types of agarose and buffer solutions, and parameters such as gel concentration, buffer SDS concentration, and quantity of gel (central thickness). The optimal gel was made from 5ml (central gel thickness 2mm) 4% NuSieve 3:1 agarose. An electrophoresis buffer containing 25mM Tris, 190mM glycine (pH8.3), and 0.1% SDS is optimal for protein separation. With this method, the standard curve was linear for reference proteins in the range of molecular weights from 14.4×103 to 97×103.
  • 坂口 和子, 鈴木 潤, 田中 雅樹, 赤堀 文昭
    2002 年 46 巻 3 号 p. 153-156
    発行日: 2002/09/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    It is known that paraquat (PQ) induces pulmonary fibrosis in some species of animals (i.e. in rat) but not in others (i.e. in rabbit). We induced pulmonary fibrosis in rat and then under the comparable conditions we observed the process in the rabbit. We examined rats and rabbits plasma samples by micro two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (M2D-PAGE) without denaturing agent, and also examined immunologically on anti-proteases (α1AT and α2M). The result showed that rat had one molecular species α1AT and four molecular isoformes of α2M. And in the rat which developed the pulmonary fibrosis, the decreases in α2M-1 and α1AT were observed. On the other hand, rabbit which under PQ administrations did not developed pulmonary fibrosis and had two isoformes of α2M and hardly recognized amount of α1AT, showed even increased α2M. The results suggest that the pulmonary fibrosis may associated the level of α2M and α1AT.
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