生物物理化学
Online ISSN : 1349-9785
Print ISSN : 0031-9082
ISSN-L : 0031-9082
50 巻, 4 号
選択された号の論文の2件中1~2を表示しています
  • 安藤 敏子, 渡邉 眞一郎, 大川 記代, 小川 登, 荏原 茂, 長澤 佳美, 石原 潤, 亀子 文子, 藤田 清貴
    2006 年 50 巻 4 号 p. 225-229
    発行日: 2006/12/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    ALT低活性異常を示す稀な例について検討を加えた. 高ALT血清との混合試験によりALT活性阻害因子の存在が確認された. 特異抗血清を用いた免疫混合法により, ALT活性阻害因子はIgG-κ型蛋白であることが判明した. 患者IgGを精製し免疫固定電気泳動を行ったところ, モノクロナールバンドは観察されなかったが, L鎖は明らかにκ鎖優位であった. SDS-PAGEを行ったところ, 患者IgG分子を構成するγ鎖は分子量約55,000, L鎖は約26,000と正常IgGとほぼ同じであり, ドメイン欠損などの分子異常は確認されなかった. また, 基質 (アラニン) および補酵素 (ピリドキサルリン酸) の添加実験では, 患者IgGのALT活性阻害に変化を認めなかったことから, 酵素活性部位に患者IgGが直接結合していないか, あるいは基質や補酵素より患者IgGの方が結合部位に対し親和性が高い可能性が考えられた. さらに, 抗γFab抗体により, 活性阻害がブロックされたことから, 患者IgG分子のFab領域がALT活性阻害に強く関与していることが示唆された.
  • 木村 成寿, 相馬 仁, 苗代 康可, 小海 康夫
    2006 年 50 巻 4 号 p. 231-236
    発行日: 2006/12/15
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    Human plasma contains a numerous number of proteins that provide variable information reflecting to physiological and pathological conditions of human body. Some of such proteins have been expected for pathobiological markers for diagnosis and drug development for human diseases. To capture plasma proteins in a manner of high-through put, several ligands have been employed, though these systems are still required many improvements. In this report, we present a novel system using liposome as a ligand to capture a wide variety of plasma proteins. One hundred micro litter of plasma was incubated with liposome of multi-lamellar vesicle in the presence of Ca2+. Proteins bound to liposome were then eluted in the presence of EGTA. A two-dimensional gel analysis revealed more than 150 proteins in one electrophoresis run in a range of pH 4-7 with a molecular weight between 100kda to 30kda. The pattern of silver-stained proteins showed reproducible with the same donor. Apparent differences were detected between the pattern under different pathologic conditions including healthy volunteer and that with patients with chronic inflammation. Taken together, the method using liposome might provide a useful biological ligand for plasma protein analysis and a novel system for proteomic approach combined with other chromatographic module.
feedback
Top