食品衛生学雑誌

報文

マヨネーズからのReal-time PCRを用いた効果的なCoxiella burnetii 検出法の開発と都内流通マヨネーズのC. burnetii 汚染調査成績

貞升健志, 田部井由紀子, 新開敬行, 長谷川道弥, 金子誠二, 平井昭彦, 仲真晶子, 石崎直人, 小田桐恵, 鎌田信 ...

2006 年 47 巻 1 号 p. 1-8
発行日: 2006/02/25
公開日: 2008/08/04

DOIhttps://doi.org/10.3358/shokueishi.47.1

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市販マヨネーズ中の効率的なCoxiella burnetii 検出法を開発した．50 gのマヨネーズよりNaCl濃度2.0 mol/Lリン酸緩衝液で，分液漏斗を用い4回抽出を行いC. burnetii を含む分画を得た．得られた抽出液を20,000×g，60分間遠心後，遠心沈渣より市販の抽出キットを用いDNAを抽出し，抽出したDNAをcom1 遺伝子領域を標的とするrealtime-PCRにより定量した．C. burnetii Nine Mile株II相菌1×10⁷個を用い，市販されている2種類のマヨネーズに添加後，抽出したDNAをcom1 遺伝子領域を標的とするrealtime-PCRにより定量し，回収率を求めたところ，回収率はそれぞれ 85.0±6.0%, 72.0±0.4%であった．また，検出限界はマヨネーズ50 g当たり500個であった．さらに，東京都内で市販されているマヨネーズ50製品を対象にnested-PCRおよびrealtime-PCRによる検査を実施した結果，C. burnetii 遺伝子を検出した例はなかった．

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CBH351トウモロコシのPCR試験における偽陽性反応の解析

門間公夫, 森内理江, 鷺直樹, 市川久次, 佐藤和恵, 戸部敞, 鎌田国広

2006 年 47 巻 1 号 p. 9-14
発行日: 2006/02/25
公開日: 2008/08/04

DOIhttps://doi.org/10.3358/shokueishi.47.9

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東京都内で入手したトウモロコシ穀粒およびトウモロコシ加工食品について定性PCR法でCBH351トウモロコシの検査を実施した．スクリーング試験では103検体中29検体(28.2%)が陽性を疑わせる結果であった．しかし確認試験ではCBH351トウモロコシは検知されず，スクリーニング試験の結果は偽陽性反応であることが明らかになった．この原因としてはスクリーニング試験用プライマーCaM03-5'とCBH02-3'の塩基配列に起因する可能性が示唆された．スクリーニング試験における偽陽性反応を避けるため新たにプライマーの設計を行った結果，特異性が高く感度の良いプライマー対TMC2-5'-TMS2-3'が得られた．

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遺伝子組換えトウモロコシ(Mon810系統)の定量PCR法を対象とした外部精度管理試験

渡邉敬浩, 笠間菊子, 菊地博之, 鈴木達也, 時下祥子, 坂田こずえ, 松木容彦, 日野明寛, 穐山浩, 米谷民雄

2006 年 47 巻 1 号 p. 15-27
発行日: 2006/02/25
公開日: 2008/08/04

DOIhttps://doi.org/10.3358/shokueishi.47.15

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遺伝子組換えトウモロコシ(Mon810系統)の定量PCR法を対象とした外部精度管理を目的に，共同試験を実施した．回収した分析結果ならびに調査項目を詳細に解析した結果，LightCyclerを使用した2機関ともに異常値が認められた．その原因について追検証した結果，機器あるいはPCR試薬が測定値の繰返し再現性に影響を与え，これが直接の原因となってMon810含量が異常値を示した可能性が示唆された．それ以外に異常値を報告した機関については，抽出DNAの影響が強く示唆された．これらの解析を行うに当たり，内在性遺伝子の測定値を指標とすることが有効であると考えられた．また，共同試験に際し改良したシリカゲル膜タイプキット法により，より簡便に，かつ短時間で安定した量のDNAを抽出することが可能となった．

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ノート

麻痺性貝毒産生渦鞭毛藻投与によるカキの毒化試験とその毒組成について

浅川学, 別府理英子, 伊藤克敏, 坪田真生子, 高山晴義, 宮澤啓輔

2006 年 47 巻 1 号 p. 28-32
発行日: 2006/02/25
公開日: 2008/08/04

DOIhttps://doi.org/10.3358/shokueishi.47.28

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広島湾産麻痺性貝毒(PSP)産生渦鞭毛藻Alexandrium tamarense の培養藻体(61.4±24.5 fmol/cell)を2, 4, 6, 8および10日間カキに投与し，毒の蓄積過程を調べた．カキのPSPの蓄積率は2, 4, 8, 10日間で3.2～18.7%であった．また，給餌したA. tamarense とカキに蓄積されたPSP組成には，顕著な相違が認められた．すなわち，A. tamarense では，GTX4や低毒性成分C2(PX2)などのβエピマーを66.3 mol%，αエピマーを29.2 mol%含んでいたが，カキ体内では毒の蓄積過程でβエピマーからαエピマーへの緩やかな組成変化が起こることが認められ，8日間の投与でαエピマーは最高値(57.7 mol%)に達した．

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