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  • 標題: 等電点電気泳動

検索結果 31件

31件の検索結果より1~20件を表示しています。
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アガロースゲル等電点電気泳動法
  • 小林 貞男, 吉原 英児
  • 生物物理化学
  • Vol. 35 (1991) No. 3
  • 公開日: 2009年03月31日
209-213
マイクロゲル等電点電気泳動法の可能性を考える
101-106
Possibilities of micro gel isoelectric focusing were discussed considering; 1) the advantages of gel electrophoresis, 2) the advantages of gel isoelectric focusing using carrier-ampholytes, and 3) the advantages of micro gel electrophoresis system for the rapid separation of functional proteins under non-denaturing conditions. The importance to develop liquid handling systems in sub-microliter level was stressed for the future separation systems of high-molecular-mass protein complexes, in which the 2-D gel size would be around 1 cm × 1 cm and all the separation processes should be automated.
  
高圧セルロースアセテート膜等電点電気泳動法
  • 戸田 年総, 芝 紀代子, 長 裕子, 中尾 真, 大橋 望彦
  • 生物物理化学
  • Vol. 31 (1987) No. 6
  • 公開日: 2009年03月31日
435-438
1.ゲル等電点電気泳動法の問題点
335-339
アガロースゲル等電点電気泳動による異常ヘモグロビン分画と判定法
  • 佐藤 昭江, 松田 武英, 原野 恵子, 原野 昭雄
  • 生物物理化学
  • Vol. 40 (1996) No. 6
  • 公開日: 2009年03月31日
325-327
カバーゲルを用いた調製用アガロースゲル等電点電気泳動
  • 吉原 英児, 鈴木 潤, 小林 貞男
  • 生物物理化学
  • Vol. 31 (1987) No. 3
  • 公開日: 2009年03月31日
135-140
A new procedure for confirmation of focusing pattern after preparative agarose gel isoelectric focusing is described. The preparative gel was covered with a thin layer agarose gel (cover gel) from the start of focusing. A printing procedure can be omitted in this procedure since the cover gel is stained after focusing. The focused cover gel pattern is more clear than the printed cellulose acetate membrane. When the dry cover gel was used, the transcription volume was a little and the recovery of protein from the preparative gel was similar to the printing procedure with the membrane. In spite of removing carbonic acid gas with the utmost care, skewed protein bands were sometimes observed and its direction of skew was irregular. Therefore, it was assumed that there are some factors caused skewed protein bands besides carbonic acid gas.
  
アガロースゲル等電点電気泳動実験法の改良
37-39
Immobiline gel 等電点電気泳動によるヒト Transferrin の microheterogeneity
  • 金丸 育恵, 牧野 義彰, 紺野 邦夫
  • 生物物理化学
  • Vol. 29 (1985) No. 3
  • 公開日: 2009年03月31日
205-210
immobiline gel 等電点電気泳動によるヒト Transferrin の microheterogeneity を検討した. 精製したヒト血清TFをpH5.0~6.0の範囲で immobiline gel による等電点電気泳動すると異なる等電点を持つ4つの分画に分離, 泳動された. 各々の等電点は, 酸性側からA: pI5.15~5.19, B: pI5.26~5.30, C: pI5.37~5.42, D: pI5.50~5.54であった. また, 6M Urea 電気泳動からA-D分画は, 全て diferric TFであることが確認された. 精製TFのA-D分画の割合は, A:B:C:D=1:3:5:1であった. 細胞表面に存在するTF receptor へのA-D分画の結合は, 阻害実験によって調べると著明な差は見られなかった. 正常ヒト血清を直接等電点電気泳動し, 抗血清中で immunofixation を行なうとA~D分画に相当する沈降線が得られたので, 正常ヒト血清中にも同じ鉄含量で等電点を異にするTF分画が存在する事が示唆された.
  
両性担体を用いない等電点電気泳動法
415-421
ストレプトリジンOのセルロースアセテート膜による等電点電気泳動
  • 鈴木 潤, 小林 貞男
  • 生物物理化学
  • Vol. 27 (1983) No. 6
  • 公開日: 2009年03月31日
349-354
Cellulose acetate membrane isoelectric focusing (CAIEF) of streptolysin O from Group A streptococci and direct detection method of hemolytic activity by red blood cell agar layering after focusing are described. Eleven hemolytic components from concentrated culture filtrate were detected which had pI values of 4.8, 5.0, 5.3, 5.4, 5.6, 5.9, 6.4, 6.6, 6.9, 7.2 and 7.4. Sensitivity of the direct detection method of hemolytic activity was examined with pI 6.5 hemolytic component prepared by preparative gel isoelectric focusing. This method was extremely sensitive, which was possible to detect 0.4 HD50 of streptolysin O. These methods were applied to the analysis of the fractions obtained by preparative polyacrylamide or Sephadex gel isoelectric focusing of concentrated culture filtrate. Reproducibility of pI value in CAIEF was comparable to that in polyacrylamide gel isoelectric focusing. The method is inexpensive and enables easy detection of hemolytic toxin.
  
血清γ-GTPアイソザイムのアガロース等電点電気泳動分析
  • 佐野 紀代子, 長 裕子, 芝 〓彦, 中尾 真
  • 生物物理化学
  • Vol. 26 (1982) No. 5
  • 公開日: 2009年03月31日
397-402
Analysis of serum γ-GTP isoenzymes was attempted with isoelectric focusing using agarose gel as a supporting medium. After testing various conditions to obtain electrophoretic patterns with good reproducibility, suspension of Ampholine in Agarose IEF was finally chosen as a supporting medium, and electrolysis at 6.25W/plate (length 12.5cm×width 11cm) for 1hr under cooling with circulating water was found to be most appropriate. A serum sample, 20μl, absorbed to a small piece of filter paper was applied onto the medium 1cm away from the cathode. Under these conditions, the pH gradient was linear in the range from pH 3.5 to 9.5, and serum proteins were clearly separated.
This method was applied to the separation of γ-GTP isoenzymes. γ-GTP was stained with γ-L-glutamyl-p-diethylaminoanilide. After electrophoresis, the gel was fixed with 50% saturated ammonium sulfate solution followed by removal of the ammonium sulfate, and then submitted to staining procedures. This pretreatment was found to give very clear and permanently preservable electrophoretic patterns. Serum γ-GTP was separeted into 7 isoenzyme bands by this method. The bands which consistently appeared were in pI range of 4.5-5.0, while a band at pI 5.5 was noted in the cases of bile stagnation, and a band at pI 6.5 was observed in cases with malignant tumors.
  
2.アガロースゲル等電点電気泳動における添加剤の影響
  • 馬場 巽, 馬場 三和, 唐下 博子, 一村 光子
  • 生物物理化学
  • Vol. 26 (1982) No. 5
  • 公開日: 2009年03月31日
341-346
カルバミル化ヒトβグロビンを用いた変性系等電点電気泳動用マーカー
  • 白鳥 三恵子, 宇田川 章子, 板倉 宏治, 戸田 年総
  • 生物物理化学
  • Vol. 39 (1995) No. 4
  • 公開日: 2009年03月31日
229-232
等電点電気泳動法 (IEF) による運動性 Aeromonas 属の可溶性蛋白分画の分析
  • 福山 正文, 鈴木 富美子, 小林 貞男, 原 元宣, 田淵 清, 伊藤 武, 古畑 勝則
  • 生物物理化学
  • Vol. 37 (1993) No. 4
  • 公開日: 2009年03月31日
217-220
運動性 Aeromonas の分類学的研究の一環として, 等電点電気泳動法により菌体可溶性蛋白分画の分析を試みた. その成績を要約すると以下のとおりである. 泳動によって得られた主要バンドについて検討したところ, A. hydrophila は等電点pI6.5 (band a), pI 6.0(band b), pI5.7 (band c) に特徴的なバンドが認められた. A. sobria の特徴は, A. hydrophila のバンドaを欠くがバンドb, cと同一のpIを示すバンドが認められた. A. caviae では, A. hydrophila およびA. sobria に認められたaあるいはb, cのバンドは認められず, pI5.8 (band d) およびpI5.4 (band e) に特有のバンドが認められた. このように3菌種間にそれぞれ特徴的なpIを示すバンドが認められ, 3菌種の鑑別の補助手段として有用である.
  
ニワトリの血清タンパク質およびリポタンパク質の等電点電気泳動法による分析
  • 七條 喜一郎, 竹内 崇, 鈴木 實, 斎藤 俊之
  • 生物物理化学
  • Vol. 35 (1991) No. 6
  • 公開日: 2009年03月31日
453-458
ヒナの成長および産卵に伴う血清タンパク質ならびにリポタンパク質の変動をIEF法で検索した. また, セ・ア膜法における鶏胚およびヒナのα-リポタンパク質の易動度とIEF像との関連性についても検討した.
その結果, セ・ア膜法では未産卵鶏と成鶏雄の血清タンパク分画像に差はみられなかった. しかし, IEF像では明らかな性差が認められた. また, 産卵鶏血清のIEF像には血清塗布位置に移動しない成分が多量にみられ, この成分は産卵鶏特有のリポタンパク質であろうと推測された.
鶏胚およびヒナのIEF法ではα-リポタンパク質のpI差はみられず, セ・ア膜法で認められるα-リポタンパク質の易動度の変化との関連性は明らかでなかった. しかし, IEF法のα2-リポタンパク質濃度とセ・ア膜法のα-リポタンパク質の易動度との間には正の相関がみられた.
  
275-277
Immunostaining method for the sensitive detection of isoferritins separated by isoelectric focusing on cellulose acetate membrane is described in this paper. Methanol was used in order to fix proteins to the membrane. Membrane was shaked in methanol immediately after isoelectric focusing and then incubated in phosphate buffered saline containing a sufficiency of antibody and 2% skim milk. Blocking, a step for filling in the blank of membrane was not necessary. Fine isoferritin profile with clear background was obtained using this procedure. The sensitivity of immunostaining was slightly higher than that of gold staining in which proteins were fixed with sulfosalicylic acid and/or trichloroacetic acid. When 250ng of liver ferritin was applied on the membrane, minor acidic isoferritin bands also were observed distinctly.
  
ウシ血清アルブミンのアルカリ変性
401-408
露出時間 (5分~6時間) を変えて20℃でpH 11.9に曝したBSAを, ゲル等電点電気泳動で分析した. native BSA monomer では3つの成分 (pI 4.84, 5.15, 5.39) が観察された. アルカリ変性によって, これら成分の等電点シフトと, 5つの新しい成分 (pI 5.48, 5.52, 5.70, 5.85, 5.91) が認められた.
これらの諸成分は, (1) native BSA monomer の主成分からなる“first fraction”(pI≦5.15), (2) SS-交換異性体からなる“second fraction”(5.15<pI>5.70)及び, (3)不可逆的に unfolding した生産物からなる“third fraction”(pI≧5.70) の3つに大別される. アルカリ変性は次の反応図式で表わされる.“first fraction”→“second fraction”→“third fraction”.
native BSA monomer を20℃で4時間pH 11.9に曝すと5つの成分1, 1", 1', 2, 3) が生じる (“second reaction”). これらの諸成分を調製用ディスクゲル電気泳動で単離したのち, ゲル等電点電気泳動で分析して次の知見を得た. 成分1と native BSA monomer は何れも“first 及び second fractions”だけからなっているが, 両成分のイオン化できる基の状態は異なっている. 成分1", 1', 2, 3は何れも3つの“fractions”からなっており, 成分2と3及び成分1"と1'とはそれぞれよく似た電荷の状態を示す.“second reaction”においては, albに結合していた脂肪酸分子は, 1→1"の反応過程で成分1に飛び移るものと推測される.
  
電気泳動像複写用EDPペーパー (Electrophoresis Duplicating paper) による等電点電気泳動像のプリント
  • 小林 貞男, 鈴木 潤, 吉原 英児
  • 生物物理化学
  • Vol. 31 (1987) No. 3
  • 公開日: 2009年03月31日
159-163
アガロース等電点電気泳動による神経変性疾患の髄液蛋白分画
  • 新井 雅信, 池田 正行, 織茂 智之, 黒沢 崇四, 冷牟田 英三, 島野 美登里, 芝 紀代子
  • 生物物理化学
  • Vol. 30 (1986) No. 6
  • 公開日: 2009年03月31日
443-448
The cerebrospinal fluid protein fractions were investigated by the agarose isoelectric focusing (agarose IEF) and the silver staining, for the purpose of elucidating protein abnormalities in the neural tissues in the degenerative neurological diseases, especially in motor neuron disease (MND), spinocerebellar degeneration (SCD) and Parkinson disease (PD).
In this study, we focused six bands, mainly composed of transferrin, separated by agarose IEF and the silver staining. Some of these bands showed double fractions, even in the cases of the control group consisted of the patients without organic disease. In MND, all patients had double fractions of one or more of these bands, and it was interesting that in some of them double fractions were seen on the band with the isoelectric point of 5.6. Double fractions were also seen in many of SCD (69%) and PD (91%). Cases in that there was positive in more alkaline zone than transferrin in this method, were more in disease groups (especially in MND and SCD) than in the control group.
This method combined agarose IEF with the silver staining seemed to be the excellent one as the investigating procedure for cerebrospinal fluid proteins.
  
界面活性剤の存在下での蛋白質の無担体等電点電気泳動
  • 安川 薫, 小島 清嗣, 真鍋 敬, 奥山 典生
  • 生物物理化学
  • Vol. 28 (1984) No. 6
  • 公開日: 2009年03月31日
393-400
We studied on the effect of various detergents on the pH gradient formed by Ampholine and also on the effect on migration rate of soluble proteins in the presence of detergents.
Nonionic detergents (Emulgen 108, Triton X-100, Brij 35) affected scarcely the pH gradient formation, and the migration rate of proteins was affected but not remarkably. As SDS (anionic detergent) concentration increased, the slope of the pH gradient decreased and the protein peak was transported cathodically.