2021 Volume 70 Issue 3 Pages 497-503
カルバペネマーゼ産生腸内細菌目細菌（CPE）スクリーニング検査を目的として「クロモアガーmSuper CARBA」（関東化学）と「chromIDTMCARBA」（ビオメリュー）の性能評価を行った。Miles & Misra法に準拠した発育支持能試験，および糞便存在下での発育支持能試験では，CPE 20株（IMP-1型17株（内ステルス型9株），KPC型1株，OXA-48型2株）を使用した。1濃度（103 CFU/mL）での発育支持能試験では，CPE 27株（IMP-1型24株（内ステルス型11株），KPC型1株，OXA-48型2株），カルバペネマーゼ非産生－カルバペネム耐性腸内細菌目細菌（non-CP-CRE）137株の計164株を使用した。mSuper CARBAは全ての試験において103 CFU/mL濃度で95%以上の高い感度を示したが，chromIDTMCARBAは30%前後となり，mSuper CARBAの有用性が示唆された。一方でmSuper CARBAは1濃度での発育支持能試験で，特異度が66.4%（91/137）となり，MEPM耐性のnon-CP-CREが偽陽性を示す傾向がある知見を得た。mSuper CARBAは，特性を把握して使用する必要があるが，ステルス型を含めたCPEを高感度に検出できるためスクリーニング検査として有用であり，適正な抗菌薬使用や院内感染対策に寄与できると考えられる。
The performances of “CHROMagar mSuper CARBA” (Kanto Chemical Co., Inc.) and “chromIDTMCARBA” (bioMérieux Japan Ltd.) in screening for carbapenemase-producing Enterobacterales (CPE) were evaluated. We used 20 CPE strains (17 IMP-1 group strains including nine stealth-type strains, one KPC group strain, and two OXA-48 group strains) for the growth ability test based on the Miles and Misra method and the test in the presence of feces. We used 27 CPE strains (24 IMP-1 group strains, one KPC group strain, and two OXA-48 group strains) and 137 non-carbapenemase-producing carbapenem-resistant Enterobacterales (non-CP-CRE) strains for the test performed at the same concentration of 103 CFU/mL. mSuper CARBA showed a high sensitivity of 95% or more at 103 CFU/mL in all tests, but that of chromIDTMCARBA was around 30%, suggesting the usefulness of mSuper CARBA. On the other hand, mSuper CARBA had a specificity of 66.4% (91/137) in the growth ability test at the same concentration, and we found that the MEPM-resistant non-CP-CRE strains tended to be detected as false positives. Although it is necessary to understand the characteristics of mSuper CARBA, the high sensitivity for detecting CPE strains including those of the stealth type is useful for screening tests, and it will contribute to the proper use of antibiotics and the prevention of nosocomial infections.
近年，カルバペネム系薬に耐性を獲得したカルバペネム耐性腸内細菌目細菌（carbapenem-resistant Enterobacterales; CRE）が世界的に問題となっており，本邦では2014年に5類感染症に指定された1)。中でもカルバペネマーゼ産生腸内細菌目細菌（carbapenemase-producing Enterobacterales; CPE）は，カルバペネマーゼ産生遺伝子が伝達性プラスミド上にコードされており，菌種を超えて伝播する特性を持つことや，β-ラクタム系薬のみならずアミノ配糖体系やフロオロキノロン系も同時に耐性を獲得していることが多く，有効性が期待できる抗菌薬がほとんどないことが多いため，最も重要な耐性菌と位置付けられている2),3)。CPEの中にはカルバペネマーゼの産生量が少ないため，カルバペネム系薬の最小発育阻止濃度（minimal inhibitory concentration; MIC）が低値を示し感性となるステルス型と呼ばれる株が存在する2),3)。EUCASTではmeropenem（MEPM）のMICが0.25～1 μg/mLで感性と判定される菌は，カルバペネマーゼ産生因子を保有する可能性があるとして，MEPMの疫学的カットオフ値を0.125 μg/mLと設定しているが，現在の自動機器による検査法ではこれらを検出することは困難である3)。一方で，カルバペネマーゼ非産生であるにも関わらず，基質拡張型β-ラクタマーゼ（extended-spectrum beta-lactamase; ESBL）産生やAmpC型β-ラクタマーゼ産生に外膜蛋白変異が加わることで，カルバペネム系薬が耐性となる株が存在しており，感染対策上CPEとの鑑別は重要となる2),4)。
薬剤耐性菌を効率良く検出する方法としてスクリーニング培地が使用されることが多い。「クロモアガーmSuper CARBA」（関東化学）と「chromIDTMCARBA」（ビオメリュー）は，酵素基質を用いたCPEスクリーニング培地である。mSuper CARBAでは，CPEのコロニーがEscherichia coliは藤色，その他腸内細菌はメタリック青に呈色される（Figure 1）。chromIDTMCARBAでは，Escherichia coli等のβ-グルクロニダーゼを産生する菌株はピンク色からワイン色，Klebsiella，Enterobacter等のβ-グルコシダーゼを産生する菌株は青色がかった緑色から青色がかった灰色に呈色される。
left: Enterobacter cloacae※1) (IMP-1※3) stealth type) middle: Klebsiella pneumoniae※2) (KPC※3)) right: Escherichia coli※2) (OXA-48※3))
※1)No growth is seen on the chromIDTMCARBA
※2)No coloration is seen on the chromIDTMCARBA
※3)Group
検出が困難とされるステルス型を含むCPEを効率良く検出することは，適正な抗菌薬使用や院内感染対策上重要である。今回，CPEスクリーニング検査を目的としてmSuper CARBAとchromIDTMCARBAの性能評価を行ったので報告する。
提供菌株は，2013年から2020年の8年間に当施設で検出したCPE 27株，カルバペネマーゼ非産生CRE（non-carbapenemase-producing-CRE; non-CP-CRE）137株の計164株を使用した。CPEは，シカジーニアス カルバペネマーゼ遺伝子型検出キット2（関東化学）により遺伝子型の確認を行った。同キットはカルバペネマーゼ遺伝子型7種類（Ambler Class A：GES型，KPC型，Ambler Class B：IMP-1型，IMP-6型，VIM型，NDM型，Ambler Class D：OXA-48型）の鑑別が可能である5)。CPEの内訳はIMP-1型24株（内ステルス型11株），KPC型1株，OXA-48型2株である。non-CP-CREはディスク拡散法または改良カルバペネム不活化法（modified carbapenem inactivation method; mCIM）により確認を行った。判定はCLSI M100-ED30に準拠して行った6)。
本研究は，本社グループ研究開発会議にて倫理審査を行い承認されている（承認番号20200219-2）。
2． 提試培地検討対象培地は，mSuper CARBAとchromIDTMCARBAを用いた。
3． 発育支持能試験保存株CPE 20株を用いた発育支持能試験は，ミスラ法（Miles & Misra）に準拠し行った7)。各菌株を滅菌生理食塩水でMcFarland 0.5に調整後，この調整液を用いて10倍希釈系列を作製し接種用菌液とした。菌液希釈10−3，10−4，10−5，10−6の各接種用菌液を10 μL各検討培地に滴下し，37℃，24時間培養後，各培地のコロニー数を計測し比較した8)。
4． 糞便存在下での発育支持能試験夾雑菌による影響を確認するため，糞便検体を用いた模擬検体を作製し，糞便存在下での発育支持能試験を行った9)。培養検査でCPEおよびCREを含まないことを確認した糞便10検体（Table 1）を滅菌生理食塩水で液状にし，濾過したものをさらに10倍希釈後，希釈用便液として用いた。発育支持能試験で作製した菌液希釈10−2，10−3，10−4，10−5の各希釈菌液を希釈用便液で10倍希釈し接種用菌液とした。菌液希釈10−3，10−4，10−5，10−6の各接種用菌液を10 μL各検討培地に滴下し，37℃，24時間培養後，各培地のコロニー数を計測し比較した8)。
| Strains | 10 fecal samples | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | |
| Aeromonas caviae | 103 | |||||||||
| Bacillus subtilis | 103 | |||||||||
| Citrobacter freundii | 103 | 103 | 104 | |||||||
| Enterobacter cloacae | 104 | 105 | 103 | |||||||
| Enterococcus faecalis | 105 | |||||||||
| Enterococcus faecium | 105 | 103 | ||||||||
| Escherichia coli | 103 | 105 | 103 | 105 | 106 | 103 | 106 | 106 | ||
| Klebsiella pneumoniae | 105 | 103 | 105 | |||||||
| Lactococcus lactis | 105 | |||||||||
| Raoultella ornithinolytica | 103 | 105 | ||||||||
| Staphylococcus aureus (MSSA) | 105 | |||||||||
| Streptococcus lutetiensis | 104 | |||||||||
103: 103 CFU/mL 105: 105 CFU/mL
104: 104 CFU/mL 106: 106 CFU/mL
CPEとnon-CP-CREの選択性を確認するために保存株であるCPE 27株，non-CP-CRE 137株の計164株を用いて1濃度（103 CFU/mL）での発育支持能試験を行った。各菌株を滅菌生理食塩水でMcFarland 0.5に調整後，この調整液を用いて10倍希釈系列を作製した。10−5の希釈菌液を10 μL各検討培地に滴下し，37℃，24時間培養後，各培地のコロニー数を計測し比較した。
mSuper CARBAでは，CPE 20株中17株が102 CFU/mL濃度で発育を認めた。発育が認められなかった3株中2株はIMP-1型（2株中1株はステルス型）で，103 CFU/mL濃度では発育を認めた。残りの1株はOXA-48型で104 CFU/mL濃度では発育を認めた（Table 2）。感度は103 CFU/mL濃度で95%，104 CFU/mL濃度で100%となった（Table 3）。
| No. | Strains | Resistant mechanism | MIC (μg/mL) | mSuper CARBA | chromIDTMCARBA | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Growth ability test | Growth ability test in feces | Growth ability test | Growth ability test in feces |
|||||||||||||||||
| IPM | MEPM | 105 | 104 | 103 | 102 | 105 | 104 | 103 | 102 | 105 | 104 | 103 | 102 | 105 | 104 | 103 | 102 | |||
| 1 | Citrobacter freundii | IMP-1※1) | ≤ 1 | 2 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 2 | Citrobacter koseri | IMP-1※1) | 4 | 8 | 10 > | 10 > | 10 > | 6 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | 10 > | 10 > | 10 > | 7 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 |
| 3 | Citrobacter koseri | IMP-1※1) | 4 | 8 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | 10 > | 10 > | 10 > | 4 | 10 > | 10 > | 10 > | 7 | 10 > | 10 > | 10 > | 4 |
| 4 | Enterobacter cloacae | IMP-1※1) | 2 | 4 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | 10 > | 10 > | 10 > | 4 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 |
| 5 | Klebsiella oxytoca | IMP-1※1) | 4 | 4 | 10 > | 10 > | 10 > | 6 | 10 > | 10 > | 18 | — | — | — | — | — | 2 | — | — | — |
| 6 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1) | 16 | > 8 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 7 | Serratia marcescens | IMP-1※1) | 8 | 4 | 10 > | 10 > | 3 | — | 10 > | 10 > | 5 | — | 10 > | 5 | 1 | — | 10 > | 3 | — | — |
| 8 | Serratia marcescens | IMP-1※1) | 2 | 2 | 10 > | 10 > | 7 | 3 | 10 > | 10 > | 7 | — | 10 > | 6 | — | — | 10 > | 7 | 4 | — |
| 9 | Enterobacter cloacae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 7 | 10 > | 10 > | 4 | — | — | — | — | — | 2 | — | — | — |
| 10 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | 10 > | 10 > | 10 > | 1 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 11 | Klebsiella oxytoca | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | — | — | — | — | 1 | — | — | — |
| 12 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | 10 > | 10 > | 10 > | 1 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 13 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 14 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 15 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 16 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 24 | — | 10 > | 10 > | 10 > | 5 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 17 | Klebsiella pneumoniae | IMP-1※1)※2) | ≤ 1 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 3 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| 18 | Klebsiella pneumoniae | KPC※1) | 32 | > 8 | 10 > | 10 > | 10 > | 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | 10 > | 10 > | 10 > | 4 | 10 > | 10 > | 10 > | 1 |
| 19 | Escherichia coli | OXA-48※1) | ≤ 1 | 2 | 10 > | 7 | — | — | 10 > | 10 > | 2 | — | 10 > | 10 > | 10 > | 4 | 10 > | 8 | — | — |
| 20 | Klebsiella pneumoniae | OXA-48※1) | 2 | ≤ 1 | 10 > | 10 > | 10 > | 4 | 10 > | 10 > | 10 > | 2 | — | — | — | — | — | — | — | — |
105: 105 CFU/mL ※1)Group
104: 104 CFU/mL ※2)Stealth type
103: 103 CFU/mL IPM: imipenem
102: 102 CFU/mL MEPM: meropenem
—: Not growing
| mSuper CARBA | chromIDTMCARBA | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 105 CFU/mL | 104 CFU/mL | 103 CFU/mL | 102 CFU/mL | 105 CFU/mL | 104 CFU/mL | 103 CFU/mL | 102 CFU/mL | |
| Growth ability test | 100% (20/20) | 100% (20/20) | 95% (19/20) | 85% (17/20) | 35% (7/20) | 35% (7/20) | 30% (6/20) | 25% (5/20) |
| Growth ability test in feces | 100% (20/20) | 100% (20/20) | 100% (20/20) | 75% (15/20) | 50% (10/20) | 35% (7/20) | 25% (5/20) | 20% (4/20) |
| Growth ability test in one concentration | 96.3% (26/27) | 33.3% (9/27) | ||||||
chromIDTMCARBAでは，CPE 20株中5株が102 CFU/mL濃度で発育を認めた。残りの15株中2株は104 CFU/mL濃度までに発育を認めたが，13株は105 CFU/mL濃度で発育を認めなかった。13株中12株がIMP-1型（12株中9株がステルス型），1株がOXA-48型であった。感度は103 CFU/mL濃度で30%，最も高濃度の105 CFU/mL濃度で35%となった。
2． 糞便存在下での発育支持能試験mSuper CARBAでは，CPE 20株中15株が102 CFU/mL濃度で発育を認めた。残りの5株は103 CFU/mL濃度で発育を認めた。5株中4株がIMP-1型（4株中1株がステルス型），1株がOXA-48型であった（Table 2）。感度は103 CFU/mL濃度で100%となった（Table 3）。
chromIDTMCARBAでは，CPE 20株中4株は102 CFU/mL濃度で発育を認めた。残りの16株中6株は105 CFU/mL濃度までに発育を認めたが，10株は105 CFU/mL濃度で発育を認めなかった。10株中9株がIMP-1型（9株中7株がステルス型），1株がOXA-48型であった。感度は103 CFU/mL濃度で25%，最も高濃度の105 CFU/mL濃度で50%となった。どちらの培地も，夾雑菌存在下において発育支持能試験と同等の結果となり，夾雑菌の発育も認めなかった。
3． 1濃度での発育支持能試験mSuper CARBAでは，CPE 27株中26株が発育を認めた。発育が認められなかった1株はOXA-48型で，104 CFU/mL濃度では発育を認めた。non-CP-CRE 137株中91株は発育を認めなかった（Table 4）。感度は96.3%，特異度は66.4%となった。偽陽性（46/137）の調査のため，non-CP-CRE 137株を，imipenem（IPM）耐性株，MEPM耐性株で大別して特異度を見ると，IPM単独耐性株89%，IPM + MEPM耐性株5.9%，MEPM単独耐性株5.0%となり，MEPM耐性株が偽陽性を示す傾向となった（Table 5）。また酵素基質により偽陽性株においてもEscherichia coliは藤色，その他腸内細菌はメタリック青に呈色された。
| Resistant mechanism | Strains | n | MIC (μg/mL) | mSuper CARBA | chromIDTMCARBA | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| IPM | MEPM | — | ≤ 10 | 10 > | — | ≤ 10 | 10 > | ||||
| non-CP-CRE (n = 137) |
IPM resistant (n = 100) |
Cedecea neteri | 1 | 4 | ≤ 1 | 1 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 |
| Citrobacter freundii | 6 | 2 | ≤ 1 | 6 | 0 | 0 | 6 | 0 | 0 | ||
| Citrobacter koseri | 1 | 2 | ≤ 1 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | ||
| Enterobacter cloacae | 23 | 2–4 | ≤ 1 | 22 | 0 | 1 | 23 | 0 | 0 | ||
| Escherichia coli | 2 | 2 | ≤ 1 | 0 | 0 | 2 | 0 | 0 | 2 | ||
| Klebsiella aerogenes | 37 | 2–4 | ≤ 1 | 36 | 0 | 1 | 37 | 0 | 0 | ||
| Klebsiella pneumoniae | 7 | 2–4 | ≤ 1 | 4 | 0 | 3 | 6 | 0 | 1 | ||
| Morganella morganii | 15 | 2–8 | ≤ 1 | 15 | 0 | 0 | 15 | 0 | 0 | ||
| Serratia marcescens | 8 | 2–4 | ≤ 1 | 5 | 0 | 3 | 3 | 0 | 5 | ||
| IPM + MEPM resistant (n = 17) |
Citrobacter koseri | 2 | 2–8 | 4–8 | 0 | 0 | 2 | 2 | 0 | 0 | |
| Enterobacter cloacae | 2 | 4–8 | 2–4 | 0 | 0 | 2 | 2 | 0 | 0 | ||
| Escherichia coli | 2 | 2 | 4–8 | 0 | 0 | 2 | 1 | 0 | 1 | ||
| Klebsiella aerogenes | 2 | 4 | 2–4 | 1 | 0 | 1 | 1 | 0 | 1 | ||
| Klebsiella pneumoniae | 2 | 16 | 2–8 | 0 | 0 | 2 | 1 | 0 | 1 | ||
| Serratia marcescens | 7 | 2–4 | 2–8 | 0 | 0 | 7 | 0 | 0 | 7 | ||
| MEPM resistant (n = 20) |
Citrobacter koseri | 9 | ≤ 1 | 2–4 | 0 | 0 | 9 | 9 | 0 | 0 | |
| Enterobacter cloacae | 1 | ≤ 1 | 2 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | ||
| Escherichia coli | 3 | ≤ 1 | 2–4 | 0 | 0 | 3 | 3 | 0 | 0 | ||
| Klebsiella pneumoniae | 7 | ≤ 1 | 2–4 | 1 | 1 | 5 | 5 | 2 | 0 | ||
| CPE (n = 27) |
IMP-1※1) (n = 13) |
Citrobacter freundii | 1 | ≤ 1 | 2 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 |
| Citrobacter koseri | 2 | 4 | 8 | 0 | 0 | 2 | 0 | 0 | 2 | ||
| Enterobacter cloacae | 2 | 2 | 4 | 0 | 0 | 2 | 0 | 0 | 2 | ||
| Klebsiella oxytoca | 3 | 2–4 | 2–4 | 0 | 0 | 3 | 3 | 0 | 0 | ||
| Klebsiella pneumoniae | 3 | ≤ 1–16 | 2– > 8 | 0 | 0 | 3 | 2 | 1 | 0 | ||
| Serratia marcescens | 2 | 2–8 | 2–4 | 0 | 2 | 0 | 1 | 1 | 0 | ||
| IMP-1※1)※2) (n = 11) |
Enterobacter cloacae | 1 | ≤ 1 | ≤ 1 | 0 | 1 | 0 | 1 | 0 | 0 | |
| Escherichia coli | 1 | ≤ 1 | ≤ 1 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | ||
| Klebsiella oxytoca | 1 | ≤ 1 | ≤ 1 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | ||
| Klebsiella pneumoniae | 8 | ≤ 1 | ≤ 1 | 0 | 0 | 8 | 8 | 0 | 0 | ||
| KPC※1) (n = 1) |
Klebsiella pneumoniae | 1 | 32 | > 8 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | |
| OXA-48※1) (n = 2) |
Escherichia coli | 1 | ≤ 1 | 2 | 1 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 | |
| Klebsiella pneumoniae | 1 | 2 | ≤ 1 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | ||
※1)Group
※2)Stealth type
—: Not growing
| Resistant antimicrobial agent in non-cp-CRE | Specificity | |
|---|---|---|
| mSuper CARBA | chromIDTMCARBA | |
| IPM | 89% (89/100) | 92% (92/100) |
| IPM + MEPM | 5.9% (1/17) | 41.2% (7/17) |
| MEPM | 5% (1/20) | 90% (18/20) |
| total | 66.4% (91/137) | 85.4% (117/137) |
chromIDTMCARBAでは，CPE 27株中9株は発育を認めた。non-CP-CRE 137株中116株は発育を認めなかった。感度は33.3%，特異度は85.4%となった。IPM，MEPM耐性株別の特異度は，IPM単独耐性株92%，IPM + MEPM耐性株41.2%，MEPM単独耐性株90%となった。
酵素基質を用いた2種類のCPEスクリーニング培地について，菌株を使用し，感度，特異度の両面から検討を行った。
感度については，mSuper CARBAでは，103 CFU/mL濃度で95～100%となり，既報と同様に高い感度を示した8),10)。検出が困難で問題となっているステルス型CPEにおいても，103 CFU/mL濃度で全ての株の発育を認めており，102 CFU/mL濃度でも85%と高い感度を示した。一方で，chromIDTMCARBAでは，103 CFU/mL濃度で25～33.3%となり，既報より低い感度を示した8),10)。特にステルス型CPEの感度が低く，対象をステルス型CPEに限定すると，感度は0～9.1%となった。既報との比較においては，本検討の方が対象株にステルス型CPEを多く用いており，そのため感度が低下したと考えられた。以上の結果からchromIDTMCARBAでは，ステルス型CPEの検出率が低い傾向にあるため，注意して使用する必要がある。
特異度については，mSuper CARBAでは，66.4%となり低い特異度を示した。non-CP-CRE 137株を，IPM耐性株，MEPM耐性株で大別して特異度を見ると，IPM単独耐性株89%に対し，IPM + MEPM耐性株5.9%，MEPM単独耐性株5.0%となり，MEPM耐性株で明らかな特異度の低下を認めており，MEPM耐性のnon-CP-CREが偽陽性を示す傾向がある知見を得た。既報との比較においては，陰性対象に用いた母集団の違いにより特異度に差が出ており，non-CP-CRE以外を用いた検討報告では高い特異度を示し8)，本検討同様にnon-CP-CREのみを用いた検討報告では低い特異度を示している11)。以上の結果から，mSuper CARBAでは，MEPM耐性のnon-CP-CREが偽陽性を示す傾向があるため，注意して使用する必要がある。一方で，chromIDTMCARBAでは，85.4%となり，高い特異度を示したが，IPM耐性株，MEPM耐性株別の特異度では，IPM単独耐性株92%，MEPM単独耐性株90%に対し，IPM + MEPM耐性株は41.2%となり特異度の低下を認めたため，注意が必要である。
糞便存在下での影響については，mSuper CARBAおよびchromIDTMCARBAでは，発育支持能試験と同等の結果となり，高い抑制性能を示した。CPEは腸管内に定着する傾向が強いため，スクリーニング検査は糞便を用いることが有用である。特に新生児や乳児では定着性が強く，2年後のCPE保菌率が20%という報告がある12)。糞便検体から，夾雑菌や糞便由来成分の影響を最小限に抑えて，スクリーニング検査を実施できるため，検出漏れのリスクを軽減することが可能である。
CPEスクリーニング培地に発育した株のCPEの鑑別については，各種方法を用いて総合的に判断する必要がある。CPE検出方法には，薬剤感受性を用いてカルバペネマーゼ産生能を推定する表現型検査（Phenotype）や，PCR法等を用いて耐性因子を特定する遺伝子検査（Genotype）があり，それぞれの特徴を把握し，目的に応じて適切に使用することが求められる13)。
酵素基質によるコロニーの呈色については，色調により菌種を推定できるケースもあったが，Escherichia coli以外では特異性が低いため，参考程度に考える必要がある。
本検討では，CPEスクリーニング検査を目的として性能評価を行ったが，検討の結果mSuper CARBAの方が，高感度のCPE検出能力を有するため有用であると考えられた。一方で，chromIDTMCARBAは，特異度は高いが，ステルス型CPEの検出率が低いため，現場は注意して使用する必要がある。mSuper CARBAは，MEPM耐性のnon-CP-CREが偽陽性を示す傾向があることに注意するなど，特性を把握して使用する必要があるが，検出が困難とされるステルス型を含めたCPEを高い感度で検出できるため，スクリーニング検査として有用であり，適正な抗菌薬使用や院内感染対策に寄与できると考えられる。
CPEは世界的に問題となっており，近年，本邦においてもCPEを原因としたアウトブレイクが散発しているため，今後，感染の拡大が懸念される。mSuper CARBAは有用性が高いため，様々な場面で積極的に使用されることにより，アウトブレイクや感染拡大の抑制に貢献できると考えられる。
本論文の要旨は第32回日本臨床微生物学会総会・学術集会で発表した。
本論文に関連し，開示すべきCOI 状態にある企業等はありません。
