Purification and characterization of a glutamic acid-specific protease from Staphylococcus epidermidis

抄録

歯周炎患者の歯肉縁下プラークから分離したStaphylococcus epidermidis分離株よりプロテアーゼを精製し, その生化学的性状を検討した。プロテアーゼの分子量はSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動で27kDaであった。N末端アミノ酸解析により26残基が明らかになり, 成熟型Staphylococcus aureus V8プロテアーゼのN末端配列と69%の相同性が認められた。本酵素のカゼイン分解活性の至適pHは約8.0であり, グルタミン酸のカルボキシル基側の結合を特異的に加水分解し, アスパラギン酸の同基側も若干分解した. 酵素活性はdiisopropyl fluorophosphateで阻害され, また, iodoacetic acidで部分的に抑制されたが, EDTAやphenylmethanesulfonyl fluorideでは阻害されず, dithiothreitolによる活性化は見られなかった。透析膜上培養法でS. epidermidisプロテアーゼの産生は顕著に認められた一方, BHI液体培養やBHI寒天培地での直接培養では産生量が極めて低かった。以上の結果から, 本S. epidermidis 27-kDaプロテアーゼは新規の誘導性グルタミン酸特異的セリンプロテアーゼであり, V8プロテアーゼ (EC 3. 4. 21. 9) の関連タンパク質であると考えられる。