培養ヒト顆粒膜黄体細胞によるinsulin-like growth factor binding protein(IGFBP)の産生分泌とその黄体細胞機能への関わり

抄録

[目的]Insulin-like growth factor(IGF)とその結合蛋白であるIGF binding protein(IGFBP)は諸臓器の機能調節に関わり，卵胞発育や黄体形成にもIGF-IGFBP系は重要な役割を果たしていることが知られている．本研究では，ヒト顆粒膜黄体細胞培養系を用いて，顆粒膜黄体細胞によるIGFBP産生分泌と黄体機能の関係を明らかにすることを目的とした．[方法]体外受精胚移植の採卵時に卵胞液，卵胞洗浄液より顆粒膜黄体細胞を採取して培養し，培養液を24時間毎に交換して培養液中estradiol(E2)，progesterone(P4)濃度を測定した．また，培養開始48時間後にhuman chorionic gonadotropin(hCG)を0，30，300，3000 mIU/ml添加して48時間培養し，無血清培養液に交換して，さらに48時間培養(培養開始後96～144時間)を続けた．この培養液中E2，P4濃度を測定するとともに，¹²⁵I-IGF-IIを用いたWestern ligand blotにてIGFBP解析を行い，bioimage analyserを用いてIGFBP濃度を定量化した．[結果]顆粒膜黄体細胞培養液中E2濃度 は時間経過に伴う変化を示さずほぼ一定であったが，P4濃度は培養開始後上昇し，培養開始後96時間でピークに達した後，120～144時間に有意な低下を示した．顆粒膜細胞培養開始後48～96時間にhCGを添加し，96～144時間に無血清培養した培養液中P4濃度は，hCG非添加群に比べてhCG 30 mIU/ml添加群で1.8倍，300 mIU/mlで3.7倍，3000mIU/mlで3.6倍に上昇した．この培養液のIGFBP解析ではIGFBP-2とIGFBP-3が検出され，IGFBP-2，IGFBP-3量はhCG添加濃度の増加に伴い減少した．とくにIGFBP-2はhCG 300，3000 mIU/ml添加群で非添加群に比較して有意な低下を示した．[結論]培養ヒト顆粒膜黄体細胞からのIGFBP-2，IGFBP-3産生分泌が黄体細胞機能の低下時期に一致して認められ，とくにIGFBP-2産生分泌はhCG添加による黄体細胞機能促進と逆相関を示して減少したことより，黄体細胞活性の制御に関与していると考えられた．〔産婦の進歩55(3)：281-287，2003(平成15年8月)〕