抄録
【目的】ウシ卵子の超低温保存は，経済形質の高い雌遺伝資源の長期的な利用に有効である。現在，卵子の超低温保存にはガラス化が最も有効とされているが,体外受精後の胚盤胞発生率は未だに低い。本研究では，高分子化合物であるポリエチレングリコ—ル（PEG）の卵子ガラス化保存液への添加について検討した。【方法】食肉センター由来の卵巣から採取した卵丘細胞−卵子複合体（COC）を20h体外成熟培養して用いた。対照区はCOCを4% エチレングリコール（EG）に12分間平衡後，35% EG + 4 Mトレハロース+5%ポリビニルピロリドン（PVP）のガラス化液に30秒間曝露し，Cryotopを用いて液体窒素に浸漬し超急速ガラス化保存した。COCは，加温およびガラス化液の希釈後2hの修復培養を行い，家畜改良センター定法によりIVFを行った。試験区は，PVPを添加せずにPEGの濃度区で3% ，5%または 7%を添加した。試験区，ガラス化対照区および新鮮対照区の加温およびIVF後の卵割率，胚盤胞発生率を比較した（試験1）。次に，さらに高濃度のPEG（7%，10%，13%）について，加温後の形態学的観察による生存率，卵割率および胚盤胞発生率を比較した（試験2）。【結果】試験1において，卵割率および胚盤胞発生率は，新鮮対照区がすべての区よりも有意に高く（P<0.01），PEG7%はPEG3%よりも有意に高かった（P<0.05）。試験2において，加温後の生存率は，PEG13%区がほかのすべての区よりも有意に低く（P<0.05），PEG7%区およびPEG10%区は新鮮対照区よりも有意に低かった（P<0.01）。卵割率および胚盤胞発生率は，すべてのPEG区が新鮮対照区よりも有意に低かったが，各PEG区間に差は認められなかった（P<0.01）。ガラス化液中のPEG濃度が13%で加温後の卵子の形態学的生存率が有意に低くなること，PEG濃度が3%よりも7%で卵割率および胚盤胞発生率が有意に高いことから，ガラス化液中の至適PEG濃度は3%以上13%未満であることが示唆された。
