卵巣におけるFXR (Farnesoid X Receptor)の機能解析

抄録

【目的】コレステロール代謝に関与するFXRは肝臓において胆汁酸をリガンドとし，ターゲット遺伝子であるSHP（Small Heterodimer Partner）の発現を誘導し胆汁酸合成を制御している。また，腸管において胆汁酸トランスポーターの発現を制御するなど，これまでFXRは腸肝組織での機能が注目されてきた。しかしながら最近，卵巣や精巣などの生殖器官においてもFXRが存在する可能性が報告された。生殖器官ではコレステロールを原料として性ホルモンが合成されており，肝臓での機能と同じくFXRがコレステロール代謝に関与していると推察できるが，その機能は全く不明である。よって，本研究は卵巣におけるFXRの機能について解析した。【方法】ICR系未成熟メスマウスからPMSG投与後48時間で卵巣を採取し，顆粒層細胞については卵胞穿刺により，前胞状卵胞および胞状卵胞については機械的に採取した。実験I：顆粒膜細胞におけるFXR及びSHPの遺伝子発現をRT-PCRにより確認した。実験II：前胞状卵胞と胞状卵胞におけるFXR及びSHPの発現量を調べた。実験III：採取した顆粒膜細胞を①無添加培地，②胆汁酸添加培地，③FXRアゴニスト添加培地，④FXRアンタゴニスト添加培地で24時間培養し，FXR及びSHPの発現量を解析した。実験IV： FXRをノックダウンした顆粒層細胞のSHPの発現量を解析した。【結果】顆粒膜細胞でFXRおよびSHPの遺伝子発現が認められ，さらに前胞状卵胞から胞状卵胞へ発育するにつれFXR及びSHPの発現量が増加した。一方，リガンド類の添加実験では，無添加区と比較して胆汁酸およびアゴニスト添加区でSHPの発現量が増加し，アンタゴニスト添加区ではその発現が減少していた。さらに，FXRをノックダウンした場合，SHPの発現量が減少したことから，顆粒膜細胞においてFXR/SHPカスケードが存在し機能している可能性が示された。今後，FXR/SHPカスケードのターゲットを探索し卵巣における機能を解明する。