抄録
クローバ根粒菌野生株Rhizobium leguminosarum bv. trifolii 4S (野生株)の共生プラスミド(pRt4Sa, 315 kb)をTn5-mobで可動化し，Agrobacterium tumefaciens A136 (pTi cured, C58株由来)をrecipientとしてtriparental matingを行った。得られたAgrobacterium transconjugantsは，ホワイトクローバに無効根粒を形成，根粒より再単離した共生菌には，pRt4Saがプラスミドとして確認される株（Afp-series）と，主染色体内への組み込みを示唆させる株（Afcs1）を単離した。本研究ではAfcs1株におけるpRt4Saの存在部位について詳しく調査した。
既に報告されているC58株の全ゲノム塩基配列を基に，A136株のDNA制限酵素断片のサイズを予測し，パルスフィールドゲル電気泳動（PFGE）を行ったところ，Afcs1株ではpRt4SがA136株のlinear chromosome上に組み込まれていることを示唆させる結果が得られた。次にAfcs1株のpRt4Sa組込み部位を詳細に解析したところ，putative P4-family integrase gene（1191 bp, 以下int）内に，pRt4Saが組込みまれていると判断しうる結果が得られた。int-pRt4Saの左連結部位の塩基配列解析を行ったところ，int gene 1191～787 bpと，pRt4Saに付加させたTn5-mob由来と考えられるright inverted region (IS50; 4285～5818 bp) がタンデムに連結していることが明らかとなった。引き続き，int gene, Tn5-mob, pRt4Saそれぞれの位置関係を解析中である。
