抄録
In vitro系は、遺伝子発現過程（転写、RNAプロセス、翻訳など）の解析に最も重要な手法である。我々は、タバコBY-2細胞の単離核よりin vitro転写系を開発した。この系は、植物RNAポリメラーゼI、II、III全ての転写を正確に行うことができる。更に、この系を改変して、pre-tRNAのスプライシングも行うことができる。この系を用いて植物固有の転写機構を解析した。ついで、単離タバコ葉緑体よりin vitro転写系、RNAエディティング系及び翻訳系をそれぞれ開発した。これらの系を用いて、核ゲノムコードの葉緑体RNAポリメラーゼの新しいプロモーターモチーフや数種の葉緑体mRNAの新しい翻訳開始機構を見出した。高等植物の葉緑体では、転写物の約30ヶ所にRNAエディディング（CからUへの変換）が起きることが知られている。In vitroRNAエディディング系を用いて、数種のmRNAのエディティングのシス配列を、エディットされるC残基の上流約10ntと同定した。ついで、各々のエディットされるC残基は、別々のトランス因子で識別されることを見出した。さらに、トランス因子がエディットされるC残基にも作用することを発見し、RNAエディディングの新しい機構モデルを提唱した。我々のRNAエディディング抽出液の調製法は、エンドウの葉緑体やミトコンドリアにも適用できる。
