抄録
我々は,人工転写活性化因子GAL4:VP16 (GV)とその結合配列UASを利用したアクティベーションタギング系を開発している。この方法ではGVを組織特異的に発現するシロイヌナズナ植物を宿主とし,そのゲノム中にUASを含むT-DNAをランダムに挿入する。UASが遺伝子の5’上流に挿入されると,その遺伝子はGVに依存して異所的に発現するので,パターン形成に機能する遺伝子では優性変異形質を獲得することが期待される。我々はこの方法により,根のパターン形成に異常を示す8つの変異体 (UAS-tagged root patterning, urp)を単離した。これらでタグされた遺伝子を決定し,さらに表現型との共分離と再形質転換実験によって原因遺伝子であることを同定した。8つの遺伝子のうち7つはAP2, NAC, C2H2 Zinc finger, R2R3 MYB, DOF, RWP-RKなどの転写因子をコードしていた。これらのうち2つは,分化マーカーを利用したスクリーニングや既知の遺伝子との相同性により既に根のパターン形成に機能することが示唆されている。一方で他の5つの遺伝子はこれまでに機能解析がなされていない。このことは我々の方法が,通常の遺伝子破壊株のスクリーニングでは見つけることの出来ない未知のパターン形成遺伝子の同定に有効であることを示している。