抄録
細胞分化の分子機構を解析する際には形質転換した細胞の挙動を個別に追跡することが不可欠である。維管束を構成する管状要素やその他の木部細胞は植物体中では器官の内部で局所的に密集して存在しており、さらに全体に比して細胞数が豊富なわけでもなく必ずしも細胞レベルでの遺伝子解析に適した状態にあるとはいえない。単離葉肉細胞から木部細胞や管状要素への分化を高頻度同調的に誘導できるヒャクニチソウ培養細胞系を用いることによりこのような難点は克服できるが、その一方で細胞への簡便な遺伝子導入法とその効果の分析・評価法が確立できていない。我々はこの培養細胞にパーティクルガン法で外来遺伝子を一過的に発現させ細胞分化の分子機構を細胞学的に解析する実験系を開発しようとている。今回はその経過を二通りの事例について報告しようと考えている。まずオーキシンはこれらの細胞への分化を誘導するもっとも基本的な因子の一つであるが、その個々の細胞における応答性の程度は明らかではなかった。そこでDR5プロモーターの配列をこれらの細胞に導入し、その発現を指標にオーキシンに対する応答性を追跡した。また管状要素分化・細胞死に伴って発現するリパーゼ遺伝子の発現、蛍光タンパク質と融合させたリパーゼタンパク質の細胞内局在、機能などの解析への適用を検討した。現在発現させた蛍光タンパク質の定量法を探索しており、それについても考察する予定である。
