ホスファチジルイノシトールリン酸、カルモジュリンと相互作用する新規カルシウム結合蛋白質の生化学的特性と生理応答

抄録

AtPCaP2 (Plasma membrane associated cation-binding protein-2)は当研究室で発見された新規カチオン結合蛋白質のホモログである。本研究ではPCaP2の生理機能の解明を目的に、発現様式と生化学的特性を検討した。GFPを用いた細胞内局在解析では、細胞膜にPCaP2-GFP蛍光が観察された。PCaP2のN端にはミリストイル化シグナル配列が存在し、この修飾に必須のGly-2を置換すると細胞質局在になったことから、PCaP2はN-ミリストイル化によって細胞膜にアンカーしていることが明らかとなった。続いてリコンビナントPCaP2を作製し生化学的特性について検討したところ、PCaP2はCa²⁺との結合能をもち、さらにPtdIns(3,5)P₂, PtdIns(4,5)P₂, PtdIns(3,4,5)P₃と相互作用した。またPCaP2はCa²⁺依存的にCaMと結合し、PtdInsPsとPCaP2の相互作用はCa²⁺/CaMによって弱められることも明らかとなった。promoter-GUS解析では、PCaP2は根毛と花粉に特異的優先的に発現すること、そして培地に高濃度のKClあるいはNaClが存在するとPCaP2は著しく誘導されることも明らかになった。PtdInsPsを介したPCaP2の情報伝達についても述べたい。