末梢血multicolor flow cytometry と血漿cell-free DNA のRHOA^G17V/IDH2^R172 変異解析を組み合わせた血管免疫芽球性T 細胞リンパ腫のliquid biopsy 診断

抄録

末梢血を用いた血管免疫芽球性T 細胞リンパ腫(AITL) の診断法を報告する．【材料と方法】リンパ節生検でAITL または類似の病理形態を示した20 例の末梢血から調整した白血球・単核球と，EDTA 血漿cell-free DNA (cfDNA) を用いた．リンパ腫細胞の検出と定量のために，2 種類の抗体パネルを用いた2 ステップの10 色 multicolor flow cytometry (M-FCM)を構築した．CD3 陽性例はTCRVβレパトア解析でクロナリティを判定した．RHOA^G17V/ IDH2^R172 変異はAS-PCR で検出した．【結果】全例でリンパ腫細胞を検出した．11 例でCD3^dim，7 例でCD3^–，3 例でCD4^dim，3 例でCD5⁺⁺，7 例でCD7^dim/–．リンパ腫細胞のCD10 陽性率は0–100%（中央値15.7％）．10 例で TCRVβレパトアのクロナリティを認めた．これらの形質はリンパ節の結果と概ね一致した．末梢血白血球に占めるリンパ腫細胞は0.01–18.22％（同0.26%），絶対数は0.5–1491.6 個/μL（同29.3 個）．RHOA 変異は14 例（70%）， IDH2変異は3 例（15%）（RHOA変異と重複）で認め，これらの結果はリンパ節，末梢血，骨髄，腹水などと一 致した．【考案】AITL では末梢血中にリンパ腫細胞が高頻度に認められる．一方，cfDNA はAS-PCR のテンプレートとして使用可能である．従って，末梢血M-FCM とcfDNA のRHOA/IDH2 変異解析を組み合わせたliquid biopsy はAITL の迅速・非侵襲的診断法である．