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Von einer 48-sta ndigen Agathultur von Typh usbazillen stellten wir eine Kochsalzaufschwemmung der Erreger (ca. 0, 0035 ccm Mikrobenleiber auf 1, 0 ccm Medium) her und versetzte dieselbe in 0, 5 proz. Karbolsaure. Die Aufschwemmung wurde dann eine halbe Stunde in einem bei 100 C siedenden Wasserbade gehalten und des weiteren durch eine L₃-Fillterkerze getrieben. Das auf diese Weise erhaltene, wasserklare Filtrat stellt das Typhusbazillenkoktoimmunogen dar, welches eine schwach positive Eiweissreaktion (Kochprobe) ergibt.
Das Typhusbazillenkoktoimmunogen teilten wir in zwei Portionen A und B. Die beiden Protionen A und B wurden eine Minute lang out Gasfiamme gekocht ; und A mit Zusatz von einigen Tropfen Essigsäure, B mit Zusatz von einigen Tropfen Aqua destillata anstatt Essigsäure. Dabei entstand bei der Portion A eine leichte Trübung, während die Portion B ganz klar blieb. Diese Trübung rührt natürlich von den geronnenen Proteinkorpern her, die im originalen Typhusbazillenkoktoimniunogen enthalten sind. Die beiden Portionen A und B wurden dann je dutch eine L₃-Icerzc filtriert, um von der Portion A die geronnenen ProteinkOrper zu beseitigen. Das wasserklare Filtrat der Portion A wurde durch Zusatz von 20 proz. Natrium carbonicum puriss cryst. neutralisiert, während das Filtrat der Portion B mit entsprechender Menge von 0, 85 proz. Kochsalzlosung verdfinnt wurde. Für die weitere Kontrolle zogen wir noch die mit 20 proz. Losung von Natrium carbonicum puriss cryst. neutralisierte Essigsäure-Kochsalzosung heran. Somit haben wir 3 Testmaterialien bereit :
1) Das originale Typhusbazillenkoktoimmunogen, das noch eine Minute lang gekocht wurde (Abküirzung : Orig.).
2) Das originale Typhusbazillenkoktoimmunogen, von dem durch Ansäuerung, eine Minute lange Abkochung und darauf folgende Kerzenfiltration die gerinnbaren Eiweisskorper total entfernt worden sind (Abkürzung : OrigKoag. Eiweiss). Dabei ist die Essigsäure mittels Natrium carbonicum puriss cryst. neutralisiert.
3) Die mittds Natrium carbonicum puriss cryst neutralisierte Essigsäure Kochsalzlosung (Abkürzung : Kontr.).

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Von oilier Kochsalzaufschwemmung- von Typhusbazillen, wovon 1, 0 ccm ca. 0, 0014 ccm Erreger enthält, stellten wit durch halhstünclige Abkocliung end Kerzenfiitration chi Koktoimmunogen zur nachstehenden Prüfung her. Dices Kolaoimmunogen wurde in 1 proz, Ldsung von Trypsin (Grübler) verzetzt, nachdem seine Alkalizität durch Zusatz.Jon Natrium carbonium puriss cryst. auf 0, 5 proz. eingestellt worden war. Gleich nach Vermengung des Koktoimmunogens nut dem Trypsin wurde das GemiP : ch teihveise in einem bei 100' C siedenden Wasserbade 10 Minuten lang erhitzt, um eine Kontrollprobc, bei der das Trypsin zwar vermischt, abet. seine Fermentwirkung sofort vernichtet worden ist, zu crlialten.
Die fibrige Portion des obigen Gcmisches des Koktoimmunogens mit dem Trypsin wurde in einem Brutofen bei 37' C 5 Tage lang digeriert, indem das Gemisch täglich cinmal mit der Hand heliebig stark geschüttelt wird. Am Ende der 5-ätigen Digerierung wurde die Fermentwirkung durch eine 10 Minuten lange Erhi.-.zung des Gemisches bei 100 C inaktiviert. Die Erg-cbnisse der 'Versuche über das IC_oktoimmunogen vor und nach der Trypsinv-erdauung gehen aus folgenden Tahellen liervor :

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Von ciner Roclisaizaufschwemmung von Typhusbazillen von der 1, 0 cciii ca. 0, 0028 ccin Erreger enthält, stellten wir durch sonst dasselbe Verfahren ein Koktoimmunogen her. Das Koktoimmunogen wurde in 1 proz. Losung von Trypsin (Grübler) versctzt, nachdem seine Alkalizität durch Zusatz von Natriuni carbonicutn puriss cryst. auf 0, 2 proz. cingestellt worden war. Die Ergebnisse der Versuche sind in folgenden Tabellen zusammengestellt :

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Typ.husbazillen aus Agaroberfläche wurden im VerNiltnis von 0, 00105 ccm Erreger auf 1, 0 ccm Medium mit 0, 85 proz. Kochsalzlosung suspendiert. Die Aufschwemmung wurde dann in einem Wasserbade bei 60°C eine Std. lang erhitzt. Die auf diesc Weise hergestellte Vakzine wurde sonst ganz genau so vie in der II. Mitteilung beschrieben untersucht. Die wichtigen Versuchs-ergebnisse sind in folgenden Tabellen zusammengestellt.

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Weber die in unserer II. Mitteilung angegebenen Testrnaterialien haben wir die Präzisionskomplernentbindungsreaktion nach R. Torikata geprüft end folgende Hefunde erhalten.

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