【総説-応用糖質科学シンポジウム-】　Irpex lacteus由来GH10キシラナーゼの新規セルロース高吸着CBM1

抄録

Irpex lacteus由来酵素製剤のDriselaseからセルロースに対する吸着を利用してタンパク質のスクリーニングを行った結果，セルロースに高吸着な分子量約42,000のGH family 10キシラナーゼ (IrpXyn10B) の存在を確認した。そのCBM1に着目しCBM1とGFPの融合タンパク質の大腸菌発現系を構築し微結晶性セルロースに対する吸着能を解析した。その結果，IrpXyn10B由来CBM1は，比較対象として用いたTrametes hirsutaのエンドグルカナーゼ(EG1)由来CBM1に対して約2倍の最大吸着量と吸着親和性を示す,高吸着CBM1であった。IrpXyn10BのCBM1は吸着に関与するW24-Y50Y51の芳香族アミノ酸残基に加えて,追加のY52が存在していた。このY52をEG1由来のCBM1型に変えたXyn10B-Y52S変異体を作製しセルロースへの吸着能を評価した結果，その吸着能はEG1由来CBM1と同程度まで低下した。これらの結果より，IrpXyn10B由来CBM1はY52が重要な役割を果たすセルロース高吸着CBM1であることが明らかとなった。