論文種目：総合論文
さまざまなタンパク質合成系で作成したSrcファミリーチロシンキナーゼのリン酸化状態と活性
2022 年 66 巻 2 号 p. 71-79
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2022 年 66 巻 2 号 p. 71-79
外来タンパク質を発現には，細胞あるいは無細胞系のタンパク質発現系を利用できる．目的のタンパク質がリン酸化などの翻訳後修飾を要する場合には系の選択が重要である．私たちは，ヒトSrcファミリーキナーゼ（SFKs） 8種類を，2種類の細胞ベースのタンパク質発現系と4種類の無細胞タンパク質発現系で合成し，それらのリン酸化状態をリン酸基親和性電気泳動法Phos-tag SDS-PAGEで解析した．真核細胞由来の系では，発現したキナーゼに翻訳後修飾に基づく複数のリン酸化状態が存在した．それぞれのキナーゼのリン酸化状態は，発現系によって明らかに異なった．キナーゼ活性の有無は，キナーゼと発現系の両方の特性に依存していた．これらの結果は，無細胞タンパク質合成系を利用したプロテオーム解析，特に翻訳後修飾を必要とするタンパク質の解析に対して重要な情報である．
