生体材料の遺伝毒性

第1報: 細胞の変異誘発機序としての“SOS修復機構”のin vitroにおける実験系の検討

抄録

“SOS機能” 発現にともなってDNA合成のfidelityの低下がみられるか否かをin vitroのDNA合成の実験系を用いて検討した。(i) 鋳型DNAとして30分間UV照射 (1.7erg/mm²/sec) をおこなったpoly (dT) oligo (dA) ならびにUV照射をおこなっていないpoly (dT) oligo (dA) の2種類を16nmol/reaction tuble,(ii) DNAポリメラーゼの代りに “SOS機能” の発現したE. coli tif菌の抽出液ならびに “SOS機能” の発現していないE. coli. tif菌の抽出液を各々21.5μg/reaction-tuble,(iii) 330pmol³H-dGTP (S.A. 7.5×10³cpm/pmol) 485pmol³H-dCTP (S.A.5.2×10³cpm) 5.6nmol¹⁴C-dATP (S.A.±60cpm/pmol),(iv) 補酵素として0.2mM MnCl₂, 300mM KCl, 以上の反応液を使用し, pH8.6, 37℃30分間incubateすることによりDNA合成をおこなわしめた。結果として, SOS機能が発現したE. coli tif菌の抽出液をDNAポリメラーゼの代りに用いた場合においてもDNA合成のfidelityの低下はみられなかった。この理由の一つにE. coli tif菌の抽出液中に含有されているtriphosphataseの作用により, reactiontubule中のdNTPが加水分解されるためであろうことが示唆された。