ウシ黄体退行中における迅速な好中球浸潤と好中球動員機構

抄録

【目的】黄体は妊娠成立・維持に重要であるプロジェステロンを産生する。ウシでは妊娠不成立の場合，PGF_2α（PGF）が子宮から放出され，黄体機能低下と構造崩壊が起きる。免疫応答を司る白血球の一種である好中球は，炎症部位に速やかに動員され貪食殺菌を行う，最も重要な生体防御機構を担う。退行中の黄体内ではマクロファージやリンパ球が動員されるが，ウシ黄体退行中の好中球の局在・動員機構および黄体機能における影響は不明である。本研究では，炎症局所に迅速に動員される好中球に着目し，退行中のウシ黄体内への好中球動員および動員機構を検証した。 【方法】実験1：中期黄体（Days 10-12）を持つウシにPGFを投与（＝0 h）し，0，5，15，30分および2時間で卵巣を採取した。黄体を回収し，PAS染色で好中球数を，real-time PCR法で好中球遊走ケモカイン（interleukin-8：IL8）および白血球接着分子（E-selectin）の遺伝子発現を解析した。実験2：発情周期中期のウシ末梢血から好中球を単離し，PGFによる好中球遊走アッセイを行った。また，好中球におけるPGF受容体（FPr）の遺伝子と蛋白発現を調べた。実験3：中期黄体由来血管内皮細胞（EC）にPGFを添加して5分後に細胞を固定し，E-selectinの蛍光免疫染色を行った。 【結果】実験1：PGF投与後5分で黄体内好中球数が有意に増加した。IL8 mRNA発現はPGF投与後30分で増加したが，E-selectin mRNA発現は5－30分で減少した。実験2：好中球でFPr は発現せず，PGFは好中球遊走性に影響しなかった。実験3：PGF添加後5分でECにおけるE-selectin発現が増加した。 以上から，ウシ黄体退行現象ではPGFは全身系で好中球に作用するのではなく，PGFが黄体内血管内皮細胞のE-selectin発現を迅速に刺激し，好中球の血管内皮細胞への接着が増加することで，黄体内に好中球が5分で動員されることが示唆された。