発生培地へのL-CarnitineおよびEtomoxir添加がウシ体外生産胚の発生率に及ぼす影響

抄録

【目的】L-Carnitine(LC)は，体細胞内においてCarnitine palmitoyltransferase 1(CPT-1)の作用により脂質代謝に関与していることが知られている。我々は，ウシ体外生産胚の発生培地へのLC添加により，胚発生率および耐凍性が向上し，脂質代謝が促進されることを見出した。本研究では，CPT-1のインヒビターによるLCの効果を検証するとともに，LC添加培地の種類が胚発生に与える影響を検討した。【方法】食肉処理場由来のウシ卵子を用いて，成熟および体外受精(Day0)を行った。体外受精後に卵丘細胞を剥離し，38.5C，5％CO₂，5％O₂，90％N₂の環境下で発生培養を行った。試験1では，LCあるいはCPT-1インヒビターであるEtomoxir(Et)の5%FCS加CR1aaへの添加が，また，試験2では発生培地にCR1aa，mSOFaa，m199を用いてLC添加の有無が，ウシ体外生産胚の胚盤胞期への発生率(Day8)に及ぼす影響を検討した。【結果】試験1における胚盤胞期への発生率は，EtとLC無添加(対照区：33.3%)と比較して，Etのみ添加(22.4%)で有意に低下し，LCのみ添加で43.9%と有意に高くなった。また，Et+LC添加では26.8%となり対照区と有意な差は認められなかった。試験2では，各培地による胚発生への影響は認められなかった。以上より，LCはウシ体外生産胚に対して，胚細胞のミトコンドリア内でCPT-1を介して作用することが示唆され，発育促進作用については培地の影響を受けないことが示された。