日本繁殖生物学会 講演要旨集
第109回日本繁殖生物学会大会
セッションID: OR2-33
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卵巣
ウシ黄体維持機構におけるepidermal growth factor receptorのcore fucosylationの役割
*羽柴 一久小林 純子佐野 栄宏前田 恵木村 吉伸奥田 潔木村 康二
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抄録

【目的】Epidermal growth factor receptor(EGFR)に結合するN型糖鎖上のcore fucoseは,epidermal growth factor(EGF)のEGFRへの結合に重要である。EGFは黄体細胞の生存を維持し,EGFRへの結合親和性は機能黄体において高いことから,黄体においてもEGFRの黄体維持作用にcore fucosylationの関与が考えられる。本研究では,1) 発情周期を通じたウシ黄体のcore fucosylationレベルとfucose含有糖タンパク質の局在,2) 黄体細胞のEGFR糖鎖のcore fucosylationの有無,3) EGFの黄体機能維持作用に及ぼすcore fucosylationの影響を検討した。【方法】1) 発情周期を通じた黄体(初期:Days 2–3,形成期:Days 5–6,中期Days 8–12,後期:Days 15–17,退行期:Days 19–21)の膜画分のcore fucosylationレベルをfucoseを認識するAALレクチンを用いて検討し,fucose含有糖タンパク質の局在を解析した。2) 中期黄体細胞から免疫沈降法によりEGFRタンパク質を回収後,core fucosylationの有無を調べた。3) 中期黄体細胞にα-fucosidase(0.01,0.1 units/ml)を添加してcore fucoseを切断し,16時間後のcore fucosylationレベル,上清中のprogesterone(P4)濃度と生存率を検討した。黄体細胞にα-fucosidase(0.1 units/ml)とEGF(5,10 ng/ml)を単独又は組み合わせて添加し,24時間後のP4濃度と生存率を調べた。【結果】1) 黄体の糖タンパク質のcore fucosylationレベルは後期,退行期と比較して,初期,形成期と中期に高く,fucose含有糖タンパク質は黄体細胞に局在した。2) 黄体細胞のEGFR糖鎖はcore fucosylationを受けていた。3) 黄体細胞の糖タンパク質のcore fucosylationレベルと生存率は,α-fucosidase添加区において減少し,P4産生に変化はなかった。EGFによる生存率の増加は,α-fucosidaseの共添加により減少し,P4産生に変化はなかった。以上より,EGFの黄体機能維持作用にEGFRのcore fucosylationが重要であり,core fucosylationの低下が黄体の構造的退行に関与する可能性が示された。

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© 2016 日本繁殖生物学会
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