ウシ黄体細胞における LH 感受性とコラーゲンの関係

抄録

【目的】黄体細胞は豊富な細胞外マトリックス（ECM）に取り囲まれていることが報告されており，黄体形成や血管新生において重要な役割を果たす。黄体の主なECMはⅠ型コラーゲンであるが，コラーゲンと黄体機能の関係について明らかではない。本研究では，ウシ黄体細胞のコラーゲンを用いた培養おける黄体機能について検討した。【方法】1）ウシ中期黄体細胞を単層プレート上（単層培養），Ⅰ型コラーゲン・ゲル上（コラーゲン・ゲル上培養），Ⅰ型コラーゲン・ゲル中（コラーゲン・ゲル包埋培養）で5日間培養した。培養後，対照区および黄体形成ホルモン（LH; 10 ng/ml）添加区を作成し24時間培養した。培養後のP4産生をenzyme immunoassayにより，LH-R mRNA発現を定量的RT-PCRにより測定した。2）コラーゲンにはゲルのような三次元構造とコラーゲン・コートのような二次元構造が存在する。これらの違いによる，黄体細胞のP4産生およびLH-R mRNA発現について検討した。ウシ中期黄体細胞を単層プレート上（単層培養），Ⅰ型コラーゲン・ゲル上（コラーゲン・ゲル上培養），Ⅰ型コラーゲン・コート培養皿上（コラーゲン・コート上培養）で5日間培養した。培養後，対照区および LH 添加区を作成し 24 時間培養した。培養後のP4産生および LH-R mRNA発現を測定した。【結果と考察】1）単層培養では，LH添加によるP4産生の増加は認められたが，コラーゲン・ゲル上およびコラーゲン・ゲル包埋培養では，LH添加による P4 産生の増加は認められず，LH-R mRNAの発現量は有意に減少した。2）コラーゲン・コート上培養においてLH添加によるP4産生の増加が認められたが，コラーゲン・ゲル上培養ではLH添加によるP4産生は増加しなかった。LH-R mRNA発現は，コラーゲン・ゲル上培養と比較して，コラーゲン・コート上培養において有意に高かった。以上の結果から，ウシ黄体細胞におけるLH感受性はコラーゲンの構造によって影響を受けることが示唆された。