【目的】卵子の人為的な活性化は，円形精子細胞との受精（ROSI），あるいは体細胞クローン動物を作る際に必須だが，それらの産仔率は精子によって活性化された受精卵と比べると低い。そこで人為的活性化が発生に悪影響を与えた可能性が考えられるため，精子が持つ卵子活性化因子PLCζのcRNAを卵子へ注入（単独注入）し，より自然に近い活性化を行う方法も実施されている。しかしこの方法は卵子により大きなダメージを与えてしまう。そこで本実験はPLCζ-cRNAの注入をROSIあるいは核移植と同時に行い（同時注入），卵子へのダメージを減らしつつ自然に近い活性化を行うことで成功率改善を試みた。【方法】マニピュレーターを用いて以下の4点を調べた。①PLCζ-cRNAの最適濃度の検討，②薬品，同時注入および単独注入による卵子活性化の差異観察，③ROSI胚およびクローン胚のエピジェネティクス修飾の調査，④胚の体外発生率および産仔率【結果】①同時注入におけるPLCζ-cRNA の最適濃度は20 μMを示した。これは単独注入の20倍の濃度だった。②活性化後に核相を経時的に観察した結果，同時注入では活性化開始時間に遅れはみられないものの，その後の脱凝縮および前核形成は遅延した。③ROSI胚とクローン胚の前核期でのH3K4me3，H3K9me3およびH3K27me3の量に差はみられなかった。④ROSI胚とクローン胚の胚盤胞への発生率は薬品と同時注入では差がなかったが，単独注入では低下した。ROSIの産仔率はどの活性化方法でも24–26％で差はなかった。一方クローンの産仔率は薬品と同時注入には差は見られなかったが（2%，1.8%），単独注入は低下した（0.5％）。卵子の活性化を顕微注入と同時に行う本方法は，より自然な活性化であるだけでなく，従来別々に行っていた活性化処理を省略できることに加え，活性化時間を個々の卵子で一致させることが可能となる全く新しい方法である（Hirose et al, Reproduction, 2020）。
