抄録
【目的】本研究室ではこれまでキナーゼ活性阻害剤であるpurvalanol Aによる胃由来腺がん細胞MKN45における放射線誘発アポトーシス誘導増強効果について検討を行ってきた。purvalanol AはCdc2のキナーゼ活性を抑制し，MKN45において放射線誘発G2/M期チェックポイント関連たんぱく質であるリン酸化Cdc2，cyclin B1，Wee1のダウンレギュレーションを引き起こすことにより，アポトーシス誘導が増強されることが明らかとなった。しかしながら，そのアポトーシス誘導に至る経路は明らかとなっていない。そこで本研究ではpurvalanol Aによる放射線誘発アポトーシス誘導における抗アポトーシスたんぱく質の発現を検討した。【方法】MKN45(wild p53)に対し，purvalanol A存在下での放射線誘発抗アポトーシスたんぱく質の検討はウエスタンブロット法にて，メッセンジャーRNA発現レベルの検討は半定量的PCR法にておこなった。【結果】MKN45に対しpurvalanol Aと放射線照射を行うと，放射線によって誘導される抗アポトーシスたんぱく質Bcl-2，Bcl-XLの発現がpurvalanol Aによって抑制されていることが明らかとなった。またIAP(inhibitor of apoptosis proteins)ファミリーメンバーのsurvivin，XIAPの発現が放射線とpurvalanol Aを共処理することにより抑制されていることが明らかとなった。メッセンジャーRNAレベルでは，Bcl-2とsurvivinの発現が抑制されていることが明らかとなった。一方，アポトーシス促進たんぱく質として知られるBaxはX線照射単独では発現になく，purvalanol Aにより抑制されたが，その程度はBcl-2と比べて有意な差は見られなかった。以上の結果からpurvalanol Aと放射線によるアポトーシス誘導は抗アポトーシスたんぱく質のダウンレギュレーションによって引き起こされていることが考えられる。
