ヒト腎細胞癌に対するモノクローナル抗体C5HのF(ab')₂フラグメントの免疫学的活性に関する研究

抄録

ヒト腎細胞癌に対するマウスモノクロナール抗体(C5H)のF(ab')₂フラグメントをin vivo studyに応用するために, F(ab')₂の生成条件を検討した.基質に対する酵素比は蛋白量で40:1で, pH3.5溶液中の反応時間を1時間以上としたときに安定したF(ab')₂フラグメント(MW 111,000)が得られることが判明した.回収率はProtein A Column,ゲル濾過により精製した場合50%であった.ヒト腎細胞癌由来樹立細胞株ACHNに対して¹²⁵I-C5Hもしくは¹²⁵I-C5HF(ab')₂を使用して免疫学的結合能をScatchard plotにより解析した結果, ¹²⁵I-C5Hの結合モル数は細胞1個あたり5.2×10⁵で結合定数(Ka)は5.4×10⁹M^-1であり, ¹²⁵I-C5H F(ab')₂の場合,各々4.7×10⁵, (Ka)は8.8×10⁹M^-1でintact MabとF(ab')₂はほぼ同様の免疫学的活性を保持していることが明らかとなった.