リアルタイムPCRを用いた担癌患者末梢血中のWT1特異的CD4陽性T細胞の定量的解析

抄録

【目　的】我々は現在WT1ペプチド(CTLエピトープ)による癌の免疫療法の臨床試験を行っており、これらの患者検体を用いて、担癌患者における癌抗原に対する免疫応答の解析を行っている。我々は最近、HLA class II分子に結合しWT1特異的Th1-typeCD4陽性T細胞を誘導可能なWT1₃₃₂ペプチドを同定した。しかし、担癌患者体内にWT1₃₃₂特異的CD4陽性T細胞が存在するかどうか、また、そのようなWT1332特異的CD4陽性T細胞の働きに関しては未知である。そこで今回、リアルタイムPCRを用いて、WT1₃₃₂による刺激により患者末梢血中のCD４陽性T細胞のIFN-γ、およびIL-10の発現量が変化するか検討した。【結果】担癌患者のCD4陽性T細胞におけるspontaneousなIFN-γの発現は健常人と比べて有意に高かった。また、IL-10に関しては健常人と比べて有意な差は認められなかった。さらにWT1₃₃₂刺激に対しての反応は、IFN-γを発現するものやIL-10を発現するものなど様々であった。WT1ワクチンの前後で比較すると、ワクチン前に比べてワクチン後でCD4陽性T細胞におけるWT1₃₃₂ペプチド刺激特異的なIFN-γの発現が増加する傾向があること、また、IFN-γとは反対に、ペプチド刺激特異的なIL-10の発現はワクチン後に減少する傾向があることが見出された。