抄録
腫瘍抗原を標的としたペプチドワクチンは，抗原ペプチド特異的CTLを増殖活性化させることで腫瘍拒絶を目指す治療法である．ペプチド特異的CTLはTCRを介して腫瘍表面に発現するHLA/ペプチド複合体(HLAp)を認識して，腫瘍を殺傷する．そのため抗腫瘍効果を得るためには，腫瘍細胞表面に標的のHLA/ペプチド複合体が発現していることが前提となる．しかし腫瘍細胞における標的のHLA/ペプチド複合体の検出には抗原特異的CTLクローンの樹立と可溶性TCRの作製が必要であり，これには多大な時間と労力を要する．今回我々は腫瘍における標的HLA/ペプチド複合体の効率的な検出・定量を目指して，TCRに類似するHLA/ペプチド複合体特異的抗体(TCR類似抗体)の作製を骨肉腫抗原PBFをモデルとして試みたので報告する．始めにナイーブドナー36人の末梢血単核球と2人の摘出扁桃のRNAよりsingle chain variable fragment(scFv)ファージディスプレイライブラリ(1x108)を作製した．次にscFvを発現するライブラリファージと抗原のパニングを行った．抗原にはビオチン化HLApモノマー(HLA-A24/PBFA24.2ペプチド，HLA-A2/PBFA2.2ペプチド)を用いた.3-4回のパニングの後，scFvファージ 94クローンをELISAでスクリーニングしてHLA-A24/PBFA24.2に反応する2クローン，HLA-A2/PBFA2.2に反応する3クローンを同定した．これらのクローンのscFvをヒトIgG1サブタイプに変換してFACS解析を行った．結果，1クローンがペプチドをパルスしたT2細胞を認識した．これらのTCR類似抗体は，腫瘍細胞表面のHLApを検出する上で今後有用と考えられた．またこれらの知見はTCR類似抗体を発現する人工CTLの開発につながる．
