葉緑体ATP合成酵素γサブユニットのΔGlu²¹⁰-Asp²¹¹-Glu²¹²変異による酸化・還元調節の逆転

抄録

　葉緑体ATP合成酵素(CF₁CF_o)のγサブユニットは、バクテリアやミトコンドリアのF₁のγサブユニットには見られない約35アミノ酸の挿入配列を持ち、この配列上のジスルフィド結合の解離（還元）により酵素が活性化する。私たちはすでに、好熱菌Bacillus PS3 F₁（TF₁）由来αβとCF₁由来γによって再構成したキメラ複合体を用いて、チオール調節部位の二つのシステイン残基に隣接する酸性アミノ酸のクラスターを削除すると(ΔGlu²¹⁰-Asp²¹¹-Glu²¹²)、酵素の酸化・還元調節が逆転することを報告している。
　このような変異導入が、酵素一分子の回転調節にどのような影響を及ぼすかを調べるため、TF₁γサブユニットにΔGlu²¹⁰-Asp²¹¹-Glu²¹²変異をもつCF₁γ由来の調節領域を導入して、安定なキメラ複合体（α₃β₃γ_TCT ΔGlu²¹⁰-Asp²¹¹-Glu²¹²）を作製した。新たに作製したキメラ複合体でもATP加水分解活性は酸化条件で活性化され、酸化還元調節の逆転が確認できた。現在、この変異体を用いた一分子回転観察を行っており、その解析結果を併せて報告する。