抄録
低温ショックドメイン(CSD)タンパク質は大腸菌から高等動植物にまで広範囲に見出される.CSDタンパク質はCSDを介した核酸結合活性を持ち,翻訳または転写レベルでタンパク質発現を調節すると考えられる.大腸菌の低温ショックタンパク質(Csp)はRNAの安定高次構造を解除するRNAシャペロンとして機能する.コムギのCSDタンパク質WCSP1は低温処理により,mRNA,タンパク質レベルで蓄積し,核酸結合活性を持つ.大腸菌中ではE. coli csp変異を相補し,RNAシャペロン活性を示す.今回,分子 beaconシステムを用いた試験管内系を用いて,RNAシャペロン機能に必要な核酸融解活性の検出を行った.その結果,WCSP1はATP非依存的に,DNA二本鎖を一本鎖に解離する核酸融解活性を示した.試験管内系においてもWCSP1が低温時のRNAがとる安定高次構造を解除するRNAシャペロンとして機能することが示唆された.更に,WCSP1タンパク質のRNA結合モチーフの変異タンパク質を用いて核酸に対する結合,核酸融解活性を解析したところ,変異タンパク質は両活性ともに消失し,RNA結合モチーフがWCSP1の機能に必須であることが示された.WCSP1の細胞内局在性の解析結果についても併せて報告する