抄録
ミヤコグサ(Lotus japonicus)はマメ科のモデル植物として、盛んに形質転換が行われている。しかし、発現プロモーターとして一般的に用いられているCaMV35Sプロモーター(35S-P)はプロモーター活性が全体的に弱いことが示唆されていた。我々は新規発現プロモーター候補として、ミヤコグサのポリユビキチン遺伝子領域をクローニングした。ポリユビキチン遺伝子のORF直前にはイントロンが存在し、この構造は他の多くの植物種でも保存されていた。イネやシロイヌナズナの形質転換系ではイントロンの存在により、ポリユビキチンプロモーター(Pubi-P)の活性が増大することが知られていたので、Pubi-Pおよびイントロンを含むPubi-Pをβ-glucuronidase(GUS)遺伝子に結合した発現ベクターを作成した。毛状根形質転換法により、Pubi-Pの500 bp以内に発現に必要なcis配列が存在することが分かった。また、イントロンによるPubi-Pのプロモーター活性の増大は認められなかったが、Pubi-Pは35S-Pの約2倍の活性を示した。Agrobacterium tumefaciensを用いた形質転換では、T0世代において、特に地上部でPubi-Pが35S-Pに対して高いGUS活性を示すことを確認している。