日本植物生理学会年会およびシンポジウム 講演要旨集
第46回日本植物生理学会年会講演要旨集
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グリセロール可溶化法を用いたM/G1境界期におけるアクチン繊維の局在の解析
*米田 新桧垣 匠佐野 俊夫馳澤 盛一郎
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p. 713

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抄録
我々はこれまでに、M/G1境界期においてフラグモプラストが崩壊し表層微小管が再形成するまでの過程に、アクチン繊維が必須であることを見出してきた。しかし、従来の蛍光顕微鏡観察による報告では、M/G1境界期において、最初に微小管が再形成される部位の近傍にはアクチン繊維は存在せず、微小管との関係は不明であった。
従来のアクチン染色法では、染色試薬などが細胞膜を透過できるように、界面活性剤を用いてきた。しかし、界面活性剤を使うことで内部の膜構造が壊れ、元の細胞質の構造が失われている可能性があった。そこで我々は、界面活性剤を用いずにローダミン・ファロイジンをタバコ培養細胞BY-2内に浸透させ、アクチン繊維を可視化することを試みた。その結果、グリセロール可溶化法を用いることで、細胞質の構造を変化させずにアクチン繊維を染色することに成功した。この方法を用いてアクチン繊維を染色することで、従来報告されていたアクチン繊維の構造のみならず、特にM/G1境界期において娘核近傍やそこから細胞表層へ伸びる細胞質糸中にもアクチン繊維を観察することが出来た。GFP-チューブリンにより微小管が可視化された形質転換体BY-GT16細胞にグリセロール可視化法を用いてアクチン染色を行うことで、M/G1境界期における微小管とアクチン繊維の関係について解析した結果について報告し考察する。
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© 2005 日本植物生理学会
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