抄録
植物の細胞周期制御は動物との類似性が高く、特にG1/S移行期の増殖制御に重要な役割を果たすRb(retinoblastoma)を中心とするシグナル経路が植物においても機能すると考えられている。Rbは転写因子E2Fに結合してその転写活性化を抑制するが、サイクリン依存キナーゼ(CDK)によりリン酸化されるとE2Fとの結合が解除され、S期移行に必要な遺伝子群の転写が活性化される。
シロイヌナズナRbはゲノムに1種類(AtRBR1)存在し、T-DNAが挿入されたホモ接合体は配偶体形成の過程で致死になることが報告されている。本研究では、RNAiによりAtRBR1を抑制させたシロイヌナズナ培養細胞を用いて機能解析を行った。まずAtRBR1のペプチド抗体を作製し、エストロジェン誘導1日後にはAtRBR1が検出できなくなることを確認した。エストロジェン処理により成長がほぼ停止したため、Laser scanning cytometerによりDNAヒストグラムを解析したところ、G1期の他にG2期で停止する細胞の割合が多いことが分かった。次にE2F制御遺伝子の発現解析をRT-PCRにより行った結果、発現が抑制されたもの(GOGAT等)とCDKB1;1のように対象と変わらないものがみられた。現在、AgilentのオリゴDNAマイクロアレイによりエストロジェン誘導後の遺伝子発現をゲノムワイドに解析している。
