抄録
二次元電気泳動法はプロテオミクスにおけるタンパク質分離ツールとして広く活用されている。しかしながら、適切なタンパク質抽出法や等電点電気泳動法を選択しないと、様々な組織から再現性良く高解像度の二次元電気泳動像を得ることは難しい。また種々の界面活性剤を用いることで効率的にタンパク質を抽出する事ができるが、これらが等電点電気泳動を妨げるために、等電点電気泳動に供する前処理として溶媒置換を行う必要があり、タンパク質調製のステップが増えることで結果としてタンパク質のロスが多くなる。そこで本発表では、界面活性剤を含むタンパク質抽出液により抽出したタンパク質を、煩雑な前処理を行うことなく等電点電気泳動に供し、高解像度な二次元電気泳動像を得るためのノウハウについて紹介する。また、タンパク質に対して非常に強い可溶化剤であるSDSを含むタンパク質抽出液を用いて調製したサンプルを等電点電気泳動に供した場合において、高解像度な泳動像が得られるSDS濃度の許容範囲と、SDS濃度依存的に分離されるタンパク質の違いについて比較検討を行った。
