抄録
植物は限定された生育環境において，糖（炭素源，C）と窒素（N）を効率よく利用するために，細胞内のC/Nを感知し適応する「C/N応答機構」を備えている．我々はこれまでに，シロイヌナズナを用いた遺伝学および生化学的解析から，新規ユビキチンリガーゼATL31がC/N応答制御機構の重要因子であることを明らかにした（Sato et al. Plant J, 60: 852, 2009）．本研究では，ATL31によるユビキチン化標的タンパク質について検討した．
ATL31にエピトープタグを付加し，免疫沈降およびMS解析を行った結果，ユビキチン化標的候補分子として14-3-3タンパク質群が同定された．14-3-3は多くのリン酸化タンパク質に結合し，その活性を制御する分子であり，CおよびN代謝に関わる酵素群の活性制御においても重要な役割を担う．その後の解析から，in vitroおよびin vivoにおいてATL31と14-3-3タンパク質が結合すること，またATL31はin vitroにおいて14-3-3タンパク質をユビキチン化することが確認された．さらに，野生型植物体内ではC/Nストレスにより特異的な14-3-3タンパク質が蓄積し，一方でATL31過剰発現体ではその蓄積が起こらないことが示された．現在ATL31によるin vivoでの14-3-3ユビキチン化の検出等の最終的な検証を行っている．
