活性酸素種生成酵素 Atrbohの活性制御機構の解析：異種共発現系の構築とAtRac/ROPの関与の検証

抄録

植物には，積極的な活性酸素種(ROS)生成を担うNADPH oxidaseの酵素本体として、rboh (respiratory burst oxidase homolog)が存在し、シロイヌナズナには10種のアイソザイムAtrbohA-Jがある。私達はヒトHEK293T細胞異種発現系を構築し、AtrbohD, Cが、Ca²⁺結合と自身のリン酸化により相乗的に活性化することを明らかにした。一方、rbohには、低分子量Gタンパク質Rac/ROP等のタンパク質が結合し、活性制御に関与する可能性が示唆されている。そこで本研究では、AtrbohのROS生成活性制御におけるAtRac/ROP等の活性制御候補因子の機能や、Ca²⁺･リン酸化による制御との関係を明らかにすることを目的に、異種共発現系の構築を試みた。HEK293T細胞にAtrbohとconstitutively active型やdominant negative型AtRac/ROPを共発現させ、ROS生成活性を指標に種々のAtRac/ROPの機能を評価した結果について報告する。ROS生成制御機構の解明における異種共発現系の有効性についても議論する。