抄録
我々はケミカルバイオロジー手法を用いて抵抗性遺伝子依存性の防御機構の解明を行っている。シロイヌナズナ培養細胞とトマト斑葉細菌病菌DC3000 avrRpm1株を96穴プレート上で感染させる独自の系を用い、市販の多様性化合物ライブラリー10,000個の大規模スクリーニングから過敏感細胞死を亢進する低分子有機化合物を7種類単離した。この中の一つであるCB_6は野生型及びSA欠損sid2変異体に添加すると防御遺伝子PR1の発現を誘導し、SAアナログ活性があることがわかった。一方でSA内生量には影響しなかったことから、CB_6はSA合成の正のフィードバック制御には関与しないと考えられた。またCB_6はSAのようにジャスモン酸(JA)によるLOX2遺伝子の発現を抑制せず、SAがJAシグナルに対して示す拮抗作用は持たないことがわかった。現在、このSAの働きを部分的に模倣するCB_6の標的タンパク質同定を複数のアプローチで進めている。化学遺伝学的手法としてCB_6の生育抑制効果に対して非感受性を示すシロイヌナズナsgi (SA agonist insensitive)変異体を14個単離し、それらのマップベースクローニングを進めている。また、生化学的手法としてビオチン化プローブによる精製実験及び酵母3ハイブリッド法を利用した探索法を検討している。
