抄録
植物の主要な光受容体であるフィトクロム蛋白質は、光受容に働くN末端領域と、キナーゼドメインを持つC末端領域の、2つの領域から成る。従来フィトクロムは、C末端領域内のキナーゼ活性により下流にシグナルを伝達すると信じられてきたが、我々の研究によりその「常識」が覆され、フィトクロムの最も主要な分子種であるフィトクロムB（phyB）のシグナル発信ドメインが、C末端領域ではなくN末端領域であることが証明された。そこで我々は、phyBシグナル伝達経路の徹底的な見直しが必要であると考え、phyB N末端領域の新奇下流因子を順遺伝学的に効率よく同定することを目的として、遺伝子機能冗長性の問題を克服するための以下の3つの工夫を凝らした挑戦的な劣性変異体スクリーニング法を開発した。1) 僅かな表現型をできる限り誇張して変異体の単離を容易にするために、シロイヌナズナのcry1phyB二重変異体背景でphyB N末端領域を過剰発現させた形質転換植物を親株として用いる。これで、野生株を親株とした時に比べて表現型を5.4倍誇張できる。2) さらに、T-DNAタギング法を用いることで、僅かな表現型しか持たない変異体の原因遺伝子クローニングを可能にする。3) 形質転換植物をタギングする際に問題となる、導入遺伝子のサイレンシングを抑える。本発表では、本スクリーニング法の詳細と解析の経過について報告する。
