高圧凍結技法を取り入れた広域透過電顕像自動取得システムの開発とその応用

抄録

近年，蛍光イメージングの発展に伴い，組織・細胞・細胞小器官・分子の動態や局在を容易に推定できるようになった．しかし，各組織・細胞にどのような形態のオルガネラが存在し，どのような状態で分布しているか超微形態レベルでの実体を把握するには，未だに透過電子顕微鏡（TEM）による観察が必須である．我々は，組織や細胞などのTEM像を広域に渡って自動撮影するシステムと，撮影したTEM像をつなぎ合わせ1枚の高解像度TEM写真を取得するプログラムを組み合わせた「広域TEM像自動取得システム」を開発した．本システムを用いて，植物組織や培養細胞などの数万枚のTEM像を自動撮影し，結合させることで，ギガピクセルクラスの写真の取得に成功している．さらに，試料を瞬時に凍結する高圧凍結技法により，広域超薄切片の作製に取り組み，動的なオルガネラの分布を広域に渡り把握することに成功している．本稿では，広域TEM像自動取得システムの原理と，高圧凍結技法で作製した超薄切片から画像取得した結果を中心に紹介する．