抄録
近年，Local Lymph Node Assay（LLNA）が新しい感作性試験として注目されている。我々の研究所では，3H-methyl thymidineを用いたLLNAに替わる方法として，OECDガイドラインの試験スケジュールに準拠し，複数のパラメーターを用いたNon-RI LLNAの検討を実施した。
実験では，8週齢の雌性CBA/Jnマウスに感作性物質であるTrimellitic anhydride (TMA; 1, 2.5, 5%)およびHexylciannamic aldehyde (HCA; 10, 25, 50%)，刺激性物質であるSodium dodecyl sulfate（SDS; 5, 10, 25%）を 3日間（Day1-3，左右耳介に25μL）塗布した。Day6にBrdU 200mg/kgを腹腔内投与し，その2時間後，耳下リンパ節を採取した。検査項目として，耳下リンパ節重量，リンパ球数（コールターカウンター），リンパ球細胞1×10４個あたりのATP活性（ルシフェラーゼ発光法）とBrdU 取り込み量（ELISA法）を測定した。
リンパ節重量およびリンパ球数は，TMA群全濃度およびHCA群25%以上で有意な増加を示した。また，その増加は用量依存性であった。SDS群では有意な増加をしめしたものの，用量依存性の変化ではなかった。ATP活性はTMAおよびHCA群の全濃度で有意な増加を示し，用量依存性の変化が認められた。SDS群では有意な増加はみられなかった。BrdU取り込み量は，TMA群の全濃度で有意に増加し，用量依存性の変化が認められた。HCA群は有意な増加はみられなかったものの，用量依存性の増加が認められた。SDS群では有意な増加はみられなかった。
以上の結果から我々の実施したLLNA法では，刺激性物質と感作性物質の鑑別が可能であることが示唆された。現在も様々な化学物質を対象に検討を継続中である。
