【背景・目的】内皮細胞は種々の増殖因子・サイトカインを産生・分泌することで, 血管機能を調節している。TGF-β1は，内皮細胞の増殖を抑制的に制御し，動脈硬化などの血管病変の進展に関与する。一方，メタロチオネイン（MT）は重金属の毒性軽減や細胞内の亜鉛代謝などに寄与する多機能な生体防御タンパク質であるが，細胞機能調節因子によるMTの誘導に関する報告は少ない。本研究では，TGF-β1による血管内皮細胞のMT遺伝子の転写誘導とそのメカニズムについて解析した。【方法】培養ウシ大動脈内皮細胞をTGF-β1で処理し，MTアイソフォーム（MT-1A，MT-1EおよびMT-2A）mRNAの発現をreal-time RT-PCR法により解析した。Smad2/3，ERK，p38 MAPKおよびJNKのリン酸化はWestern Blot法で検出した。siRNAはリポフェクション法により導入した。【結果・考察】血管内皮細胞において，TGF-β1の濃度および時間に依存してMT-1A/2A mRNAレベルが上昇したが，この上昇はTGF-β1中和抗体の同時処理により消失した。TGF-β受容体ALK1またはALK5 siRNAを導入した内皮細胞では，ALK5の発現抑制によりMT-1A/2A mRNAの発現の上昇が抑制された。ALK5下流のSmad2およびSmad3のsiRNAをそれぞれ導入したところ，Smad2 siRNAによりMT-1A/2A mRNAの発現上昇が抑制された。またnon-Smad経路としてMAPK経路を検討したところ，TGF-β1により全てのMAPKsが活性化したが，p38 MAPKおよびJNK阻害剤によりTGF-β1によるMT-1A mRNAの発現上昇のみが抑制された。以上の結果より，TGF-β1は内皮細胞のMT-1A/2A遺伝子を転写誘導すること，この誘導はALK5を介したSmad2シグナルの活性化に介在されること，およびp38 MAPKおよびJNKの活性化はMT-1Aの転写誘導を選択的に介在することが明らかになった。
