ヒアルロニダーゼ活性の高感度測定方法の検討と犬尿中ヒアルロニダーゼの特性解析

抄録

今回，犬尿中ヒアルロニダーゼ（犬u-HAase）の椎間板ヘルニア治療薬への応用研究として，その高感度活性測定方法の検討と特性解析を行った。蛍光標識ヒアルロン酸（FAHA）を用いた方法は，HAaseの測定感度が従来方法に比べ30倍以上高く，1.0 IU/ml以下の測定ができる高感度の測定方法である。犬u-HAaseはクロマトグラフからエンド型のグリコシダーゼと判断され，分子量は39,000と推定された。その活性は，pH3.6以上では基質のpHの上昇に伴い低下，pH5.0以上では消失し，ヒアルロン酸，コンドロイチン硫酸A，D，Cの順で分解し，犬粉末髄核からプロテオグリカンを有意に遊出させた。犬u-HAaseは，人Hyal-1と類似した性質を有し，犬尿中のHyal-1に由来した低分子酵素と推測される。今回，犬u-HAaseは犬髄核に対して高い融解活性を示したことから，今後，犬の髄核融解療法への適用が大いに期待できる。